[发明专利]一种L‑丙氨酸高密度菌液培养基及其培养方法在审
申请号: | 201710551548.9 | 申请日: | 2017-07-07 |
公开(公告)号: | CN107164283A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 张习伟;张仲良;李霆;李敬敬 | 申请(专利权)人: | 精晶药业股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/06;C12R1/19 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所13120 | 代理人: | 陆林生 |
地址: | 055550*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丙氨酸 高密度 培养基 及其 培养 方法 | ||
1.一种L-丙氨酸高密度菌液培养基,其特征在于:所述培养基包括第一原料和第二原料,所述第一原料包括如下重量份数的下列组分:甘油1-10份,酵母粉10-30份,大豆蛋白胨5-15份,麦芽汁1-10份,磷酸铵1-5份,磷酸二氢钾1-5份,三水磷酸氢二钾3-15份,氯化钠1-5份;所述第二原料包括20-40ppm的六水氯化钴,2-4ppm的一水硫酸锰,20-40ppm的二水钼酸钠。
2.如权利要求1所述的L-丙氨酸高密度菌液培养基,其特征在于:所述麦芽汁的质量浓度为12-17%。
3.一种L-丙氨酸高密度菌液培养方法,其特征在于:所述培养方法至少包括以下步骤:
步骤1、按照如权利要求1或2所述L-丙氨酸高密度菌液培养基的原料配方称取各组分,将各组分溶解于水中,调节pH为7.0-7.2,得到培养基;
步骤2、将培养基分装后进行消毒灭菌;
步骤3、在所述培养基中接入菌种,进行摇瓶培养,其中,所述菌种的接入量为所述培养基总重的0.1%;
步骤4、培养完毕后,得到种子液,经放大发酵处理得到L-丙氨酸高密度菌液,所述放大发酵的时间为24-28h。
4.如权利要求3所述的L-丙氨酸高密度菌液培养方法,其特征在于:所述步骤3中菌种培养条件为:培养温度为35-38℃,摇瓶转速为200-220rpm。
5.如权利要求3所述的L-丙氨酸高密度菌液培养方法,其特征在于:所述放大发酵前,还包括对所述种子液进行检测,检测标准满足:pH值为6.8-7.4,OD600值为18-30,镜检无菌。
6.如权利要求3所述的L-丙氨酸高密度菌液培养方法,其特征在于:所述菌种为大肠杆菌。
7.如权利要求3所述的L-丙氨酸高密度菌液培养方法,其特征在于:所述步骤2中,消毒灭菌条件为:温度120-122℃,时间20-30min。
8.如权利要求3所述的L-丙氨酸高密度菌液培养方法,其特征在于:采用20wt%的氢氧化钠调节所述培养基的pH。
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