[发明专利]一种牛跟腱Ⅰ型胶原的提取方法有效
申请号: | 201710556237.1 | 申请日: | 2017-07-10 |
公开(公告)号: | CN107227330B | 公开(公告)日: | 2020-12-08 |
发明(设计)人: | 司志华;胡科 | 申请(专利权)人: | 山东省千佛山医院 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 250000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种牛 跟腱 胶原 提取 方法 | ||
1.一种牛跟腱Ⅰ型胶原的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将新鲜牛跟腱洗净后,去除脂肪、腱膜及肌肉,切块,加入碳酸氢钠水溶液浸泡16h,取出后去离子水清洗,晾干得纯牛跟腱;
(2)将纯牛跟腱加入到含有三乙醇胺的肉豆蔻酸溶液中浸泡2-3h,取出后去离子水清洗,晾干;
所述肉豆蔻酸溶液的质量分数为5-8%;
所述肉豆蔻酸溶液中每1L含有三乙醇胺的含量为0.1-0.15g;
(3)将液氮中加入上述晾干的牛跟腱,待不沸腾后研磨成粉末,得牛跟腱粉末;
(4)取20g牛跟腱粉末,加入1000mL醋酸-醋酸钠缓冲溶液,加入胃蛋白酶,角鲨烯,搅拌均匀后,在35-37℃下,搅拌酶解40-50h,然后加入二巯基乙酸乙二醇酯,在28-30℃下,振荡反应2-3h,得酶解液;
所述胃蛋白酶的加入量占牛跟腱粉末重量的0.6-0.8%;所述角鲨烯的加入量占牛跟腱粉末重量的0.2-0.3%;
所述二巯基乙酸乙二醇酯同牛跟腱粉末的质量比为0.5:1;
(5)将酶解液盐析透析后,得牛跟腱Ⅰ型胶原。
2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述碳酸氢钠水溶液的质量分数为10%。
3.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液的pH值为3.5。
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