[发明专利]一种岩藻糖化硫酸软骨素FCS

说明书

本发明提供了一种新型岩藻糖化硫酸软骨素FCS_hm及其制备方法和应用。所述岩藻糖化硫酸软骨素的分子量为50~200 kDa，硫酸根含量为20~40%，其主链主要由硫酸软骨素A和硫酸软骨素E组成，所述FCS_hm主要由四种结构片段组成，且其侧链含有1~5个岩藻糖。所述FCS_hm通过内源性凝血途径发挥较好的抗凝血及抗血栓活性，与低分子量肝素类似，且对抗凝血酶III介导的FIIa和FXa均具有抑制作用。此外，所述FCS_hm还与成纤维细胞生长因子FGF1和FGF2具有较高的亲和力，存在抗血管生成作用。本发明提供的化合物制备工艺成本低、操作简单，容易产业化生产。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种新型岩藻糖化硫酸软骨素 FCS_hm及其制备方法和应用。

背景技术

岩藻糖化硫酸软骨素(Fucosylated chondroitin sulfate，FCS)是来源于海参体壁中的一种糖胺聚糖(GAG)，是带有岩藻糖支链的天然酸性粘多糖。其主链结构由葡萄糖醛酸(GlcA)和乙酰氨基半乳糖(GalNAc)通过β-1，3/β-1，4糖苷键交替连接构成，GlcA在C3位通过α-1，3糖苷键连接岩藻糖(Fuc)支链，这是目前报道的绝大多数FCS的基本结构。中国专利(公开号：CN106349407A) 公开了主链以β-1，4-D-GlcA和β-1，3-D-GalNAc为二糖重复单元、支链为α-1，3-L- 岩藻寡糖硫酸酯的FCS在制备抗特鲁索综合征的药物中的应用。然而Fuc的连接位置并不固定，也有文献通过核磁手段证明Fuc通过α-1，6或α-1，4糖苷键连接于GalNAc的C6或C4位，但目前对此种类型的FCS研究较少。

FCS具有多种潜在的生物活性，但目前大部分研究仍集中于其抗凝与抗血栓作用上。如中国专利(公开号：CN104147040A)公开了重均分子量为大于 54,500Da的海参糖胺聚糖在制备防治血栓栓塞疾病药物中的应用；中国专利(公开号：CN104147040A)公开了重均分子量为大于20,000Da的黑海参解聚海参糖胺聚糖或天然分子段的黑海参海参糖胺聚糖在制备防治血栓栓塞疾病药物中的应用，且其抗凝活性呈剂量依赖性，其随剂量增加凝血作用递增缓和，并且在同一剂量下随着重均分子量增加起效时间延迟的同时药效持续时间增加；中国专利(公开号：CN103536621A)公开了重均分子量为90kDa至130kDa海参糖胺聚糖在动物水平上具有显著的抗血小板聚集、抗凝、促进纤溶、降低血粘度、调节血脂、抗病毒等多种生理活性，可以用于制备治疗冠脉综合症药物。此外，国际专利(WO2013/026113A1)公开了海参来源的FCS在动物体内可用于肿瘤转移的预防和/或治疗。

成纤维细胞生长因子(FGF)能促进成纤维细胞有丝分裂、中胚层细胞的生长，还可刺激血管形成，在创伤愈合及肢体再生中发挥作用。作为内皮细胞迁移和增殖的修饰因子以及血管生成因子，FGF1在血管生成和肿瘤发生中起重要作用。FGF2也称为碱性成纤维细胞生长因子，存在于正常组织中的基底膜和血管内皮细胞外基质中。在正常组织的伤口愈合和肿瘤发展过程中，活化的FGF2介导新血管的形成。目前并未有专利或文献报道FCS与成纤维细胞生长因子之间的相互作用。

发明内容

针对目前技术对阐明FCS精细结构中存在的问题及FCS与成纤维细胞生长因子相互作用研究的空白，本发明提供了一种新型岩藻糖化硫酸软骨素FCS_hm及其制备方法和应用。本发明从Holothuria Mexicana海参中提取了一种新型岩藻糖化硫酸软骨素(FCS_hm)，并通过核磁和液质两种方式对其结构进行了阐述，并进一步证明所得FCS_hm具有较好的抗凝活性及与FGF1和FGF2的高亲和活性。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：