[发明专利]一种生产郁金香组培苗的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组培繁育领域，具体涉及一种生产郁金香组培苗的方法。

背景技术

郁金香为百合科郁金香属的草本植物。多年生球根花卉，花型多样、花色丰富、株型挺拔，深受人们喜爱。郁金香的生长期适温为5-20℃，最佳温度为15-18℃，植株的生育温度应保持在0-25℃，郁金香较喜肥，土壤酸碱度以中性偏碱为好，郁金香自然繁殖速度慢，繁殖系数低，并且其种球病毒易积累使种球退化或逐渐死亡，为了解决这一问题郁金香植物组织培养技术迅速发展。但是组培苗鳞茎小、成活率低成为阻碍郁金香组培快繁的一个难题。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种生产郁金香组培苗的方法，该种生产方法能获得鳞茎较大、生长迅速、植株健壮的郁金香组培苗，有效地提高组培苗之后的移栽成活率。

为了达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现的：

一种生产郁金香组培苗的方法，按照以下步骤进行：

(1)外植体消毒：选取健康无病的郁金香花种子作为外植体，将种子经流水冲洗2-4min后，在超净工作台上用体积百分数为75％的乙醇溶液表面灭菌1-3min，无菌水冲洗3次，用质量百分数为0.1-0.3％的HgCl₂溶液灭菌4-6min，无菌水冲洗4-6次；

(2)郁金香花提取液的制备：取适量新鲜郁金香花瓣加入到开放的提取罐中，加入水加热到煮沸状态煎煮40-60min，叶片与水的料液体积比为1:2-4，之后倒出提取液至液体存储罐中；再向提取罐中加入水加热到煮沸状态煎煮1-2h，且叶片与水的料液体积比为1:3-5，倒出提取液至所述液体存储罐中，最后浓缩液体存储罐中的提取液至原体积的1/5-1/3，得郁金香花提取液；

(3)接种诱导：将步骤(1)消毒后的外植体接种于固体培养基上进行愈伤诱导，促使发芽成苗，其中固体培养基以1/2MS为基本培养基，并添加30-50g/L郁金香花提取液，另外再在固体培养基中添加10-20g/L的NH₄HCO₃调节PH值至7.0-7.5；

(4)增值继代培养：切取步骤(2)中形成的幼苗茎段2-4cm，转入到继代固体培养基中，直至茎段增殖，得丛生芽，其中固体培养基以1/2B5为基本培养基，并添加20-30g/L郁金香花提取液，另外再在固体培养基中添加10-20g/L的NH₄HCO₃调节PH值至7.0-7.5；

(5)生根培养：待所述丛生芽的单芽长至3.0-5.0cm时，将郁金香组培苗移植至生根培养基中，其培养基以1/2MS为基本培养基，并添加30-40g/L郁金香花提取液，另外再在固体培养基中添加10-20g/L的NH₄HCO₃调节PH值至7.0-7.5。

进一步地，所述接种诱导的固体培养基中另外还添加0.4-0.6mg/LNAA、0.2-0.4mg/L6-BA及15-25g/L蔗糖。

进一步地，所述接种诱导培养的环境条件为：室内温度为10±2℃，室内光照强度为1000-1200lx，光照时间设定为12±1h/d。

进一步地，所述增值继代培养的固体培养基中另外还添加0.4-0.6mg/LNAA、0.6-0.8mg/L6-BA、25-35g/L蔗糖及琼脂4.0～6.0g/L。

进一步地，所述增值继代培养的环境条件为：室内温度为15±2℃，室内光照强度为1000-1500lx，光照时间设定为12±1h/d。

进一步地，所述生根培养的固体培养基中还另外添加0.2-0.4mg/LIBA、0.4-0.6mg/LNAA、20-30g/L甘露醇、30-40g/L蔗糖以及3.0-5.0g/L琼脂。

进一步地，所述生根培养的环境条件为：室内温度为8-15℃，室内光照强度为1000-2000lx，光照时间设定为8-12h/d。

更进一步地，所述生根培养的环境条件为：室内温度为13±1℃，室内光照强度为1200-1400lx，光照时间设定为10±1h/d。

本发明具有如下的有益效果：

(1)本发明大大缩短了郁金香的育苗周期，节省了育苗材料，克服了传统郁金香育苗方法中存在的育苗所需材料多、周期长等问题，大大降低了生产成本，提高了生产效率，解决了目前郁金香种植成活率低、繁殖周期长、品质退化等问题；