[发明专利]一种肿瘤免疫治疗预测生物标志物PD-L2靶向多肽及其应用

说明书

本发明涉及一种肿瘤免疫治疗预测生物标志物PD‑L2靶向多肽及其应用，所述多肽通式为：HX₁RX₂X₃X₄X₅RIRN。本发明还涉及编码该多肽的DNA片段，表达该多肽的表达载体及宿主细胞，由该多肽形成的二价体、多价体或药物组合物。本发明的多肽可用于检测肿瘤细胞和免疫细胞中PD‑L2的表达情况，作为预测抗PD‑L1/PD‑L2‑PD‑1疗法临床疗效的检测指标，同时可特异区分高同源性的PD‑L1和PD‑L2蛋白，对优化个体患者的治疗方案和疗效监测有着重要的临床价值和意义。

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术和药物化学领域，具体涉及PD-L2特异性靶向多肽筛选及其应用，尤其涉及一种肿瘤免疫治疗相关靶向多肽的制备方法及其应用。

背景技术

目前，随着对肿瘤免疫逃逸机制研究的不断深入，针对免疫检查点的抑制剂在多种实体瘤的治疗中表现出了较好的临床效果，成为癌症治疗史上里程碑式的事件，使人们认识到免疫治疗能够真正成为恶性肿瘤治疗的重要角色。其中PD-L1/PD-L2-PD-1途径作为重要的细胞周期检查点，发挥着特异性的抗原依赖性负性调控作用，它们结合可以使T细胞的免疫活性受到抑制，在免疫耐受中发挥重要作用，这也是肿瘤细胞免疫逃逸的重要原因。PD-1/PD-L2途径可在淋巴样组织和实质器官组织部位双重抑制淋巴细胞的活化,在维持机体的外周耐受、防止过度的免疫损伤及自身免疫性疾病的发生方面发挥重要的作用。PD-L1/PD-L2-PD-1途径是目前最热门的抗肿瘤免疫治疗的靶分子之一，具有巨大的应用价值。

PD-1分子有两种配体—PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)，PD-L2作为B7家族的第5个成员，是Tseng等在2001年研究PD-L1功能时被发现的。人的PD-L2定位于人染色体9p24.2，其cDNA的全长约为1.7kb与PD-L1转录方向相同，两者仅间隔4.2kb。PD-L2基因编码247个氨基酸，相对分子量约25kD，包含有IgV样区、IgC样区、跨膜区及一个短的胞浆区尾部。人和鼠的PD-L2mRNA在胎盘、肝癌细胞、乳癌细胞和神经母细胞中呈高表达，但在脾脏、淋巴结、胸腺和成纤维组织中呈低表达，这些使得其和PD-L1与其他B7家族成员在表达谱上有很大的差异。另外，两者在mRNA水平上的差异甚大，如人胎肝高表达PD-L1，而人的胰腺和肝高表达PD-L2。PD-L1在IFN-γ作用下表达上调,而PD-L2却在IL-4和IL-13的作用下表达上调。PD-L2主要表达于单核细胞上，并在DC上呈选择性表达。PD-L1和PD-L2在基因水平上有37.4％的同源性，在氨基酸水平上，PD-L1与PD-L2之间有34％的一致性和48％的相似性。但PD-L1/PD-L2与B7-1/B7-2仅有20％的同源性，这些可能导致它们在功能上的差异性。PD-L2是除IL-12外又一种介导Th1细胞反应的重要因子。PD-L1表达在免疫细胞细胞和肿瘤细胞上，而PD-L2主要由抗原呈递细胞表达，包括巨噬细胞，树突状细胞，肥大细胞和一些B细胞，以响应白介素(IL)4和干扰素。总体来看，PD-L2相比于PD-L1的表达范围更窄一些。目前上市的5个anti-PD-1/PD-L1单抗药物(Opdivo、Keytruda、Tecentriq、Bavencio、Imfinzi)，可以跟T细胞上的PD-1蛋白结合，所以可以同时阻断PD-1和PD-L1以及PD-L2的结合；而PD-L1抗体只能和PD-L1结合，所以只能阻断PD-1跟PD-L1的结合，不能阻断PD-1跟PD-L2的结合，所以使用PD-L1抗体意味着T细胞还可能被PD-1/PD-L2通路抑制。不管是PD-L1，还是PD-L2，一旦与PD-1结合，就会使T细胞的功能受到抑制，从而让肿瘤细胞逃脱了免疫系统的追杀。