[发明专利]GST-SOD1-X-R9融合蛋白及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201710572456.9 | 申请日： | 2017-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN107400167B | 公开（公告）日： | 2021-04-27 |
| 发明（设计）人： | 潘剑茹;李玲玲 | 申请（专利权）人： | 福州大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;A61K38/44;A61P39/06;A61P39/00;A61K47/40 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | gst sod1 r9 融合 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.GST-SOD1-X-R9融合蛋白在制备防治放射损伤药物中的应用，其特征在于：所述融合蛋白包含人铜锌超氧化物歧化酶SOD1、可被基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9识别并降解的连接肽X、带有九个精氨酸的穿膜肽R9、谷胱甘肽S转移酶GST；连接肽X的氨基酸序列为PLGLAG；穿膜肽R9的氨基酸序列为RRRRRRRRR；所述GST-SOD1-X-R9融合蛋白其蛋白序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：GST-SOD1-X-R9融合蛋白的制备方法，采用基因重组技术，根据Genbank中人铜锌超氧化物歧化酶的基因序列，融合可被基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9识别并降解的连接肽X以及带有九个精氨酸的穿膜肽R9，并将合成的SOD1-X-R9基因插入含有GST序列的pGEX4T-1质粒，得到pGEX4T-1-SOD1-X-R9表达质粒，然后在大肠杆菌BL21（DE3）中得到高表达量的可溶GST-SOD1-X-R9；通过硫酸铵沉淀及GST亲和层析从菌体破碎液中提取高纯度的GST-SOD1-X-R9融合蛋白。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：GST-SOD1-X-R9融合蛋白的使用蛋白浓度为0.5-1.5 mg/ml；将无菌过滤过的GST-SOD1-X-R9融合蛋白以无菌的PBS或生理盐水稀释至使用浓度。
4.如权利要求1所述的GST-SOD1-X-R9融合蛋白在制备防治由自由基引起的氧化损伤药物中的应用。
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