[发明专利]一种Cas蛋白的用途及靶标核酸分子的检测方法和试剂盒

权利要求书

1.一种非诊断目的的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，向含有待检靶标核酸分子的体系中加入向导RNA、Cas蛋白、核酸探针、缓冲液，然后对核酸探针进行检测，所述Cas蛋白为Cas12a或者具有与Cas12a的旁路单链DNA切割活性类似的Cas蛋白，并且所述的核酸探针为DNA。

2.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述的具有与Cas12a的旁路单链DNA切割活性类似的Cas蛋白是C2c1。

3.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述的Cas12a为FnCas12a、AsCas12a、LbCas12a、Lb5Cas12a、HkCas12a、OsCas12a、TsCas12a、BbCas12a、BoCas12a或Lb4Cas12a中一种。

4.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述的Cas12a为LbCas12a或FnCas12a。

5.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，向导RNA是指引导Cas蛋白特异性结合靶标DNA的RNA。

6.根据权利要求1所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述核酸探针为单链DNA。

7.如权利要求6所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述的单链DNA为荧光标记的单链DNA。

8.如权利要求6所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，所述的单链DNA为在5′端标记荧光基团HEX并在3′端标记淬灭 基团BHQ1后的荧光探针。

9.根据权利要求1至8中任意一项所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，待检靶标核酸分子的反应体系中的待检靶标核酸分子通过扩增得到。

10.根据权利要求9所述的靶标核酸分子的检测方法，其特征在于，该检测方法可检测病原微生物、基因突变或特异靶标DNA。

11.一种Cas蛋白在制备靶标核酸分子的检测制剂中的用途，其特征在于，所述Cas蛋白为Cas12a或者具有与Cas12a的旁路单链DNA切割活性类似的Cas蛋白。

12.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述的具有与Cas12a的旁路单链DNA切割活性类似的Cas蛋白是C2c1。

13.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述的Cas12a为FnCas12a、AsCas12a、LbCas12a、Lb5Cas12a、HkCas12a、OsCas12a、TsCas12a、BbCas12a、BoCas12a或Lb4Cas12a中一种。

14.根据权利要求11的用途，其特征在于，所述的Cas12a为LbCas12a或FnCas12a。

15.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，靶标DNA、向导RNA和Cas蛋白形成三元复合体时，该复合物会切割体系中其它的单链DNA分子；所述的向导RNA是指引导Cas蛋白特异性结合靶标DNA的RNA。

16.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述核酸探针为单链DNA。

17.根据权利要求16所述的用途，其特征在于，所述的单链DNA是荧光标记的单链DNA。

18.根据权利要求16所述的用途，其特征在于，所述的单链DNA是在5′端标记荧光基团HEX并在3′端标记淬灭 基团BHQ1后的荧光探针。