[发明专利]γ-聚谷氨酸的发酵工艺

权利要求书

1.一种γ-聚谷氨酸的发酵工艺，其特征在于，包括：

S1：制备枯草芽孢杆菌种子液；

S2：将枯草芽孢杆菌种子液接种于液态发酵培养基中，于37℃、120r/min摇瓶培养12-16 h后，得发酵液；

采用频率为10-20Khz且功率为5W/mL的超声波处理发酵液3-5min后，其中，所述超声波处理的具体步骤为：每超声30s后，间隔30s再次超声；

将超声波处理得到的发酵液低温保存并加入肽聚糖冷冻胶囊，补料，再继续37℃、120r/min摇瓶培养96h；

S3：对发酵液进行提取、纯化，得到 γ-聚谷氨酸；

其中，制备肽聚糖冷冻胶囊的具体的步骤为：

S4：按质量比3:1将肽聚糖和魔芋粉混合，向其中投入质量为肽聚糖2倍的磁化水搅拌，以冷却速度3℃/min降至4℃，于磁场强度为0.45T的磁场环境保温保持静置24h，得肽聚糖混合液；

S5：然后将肽聚糖混合液分装到多个淀粉胶囊壳内，其中每个淀粉胶囊壳盛装3g步骤s4得到的肽聚糖混合液；

S6：再以冷却速度5℃/min将盛装肽聚糖混合液的淀粉胶囊壳冷却至-12℃，保温6h，得肽聚糖冷冻胶囊；

所述液态发酵培养基的碳源浓度为10-15 g/L；

所述补料工艺的具体步骤为：在S2中将发酵液低温保存后，添加甘油和麦芽糖的混合物维持发酵液中碳源浓度为40-60g/L；

所述补料工艺的补料次数为两次；第一次补料时间为：在S2中将发酵液低温保存后；第二次补料与第一次补料的间隔时间为36-40h；

所述发酵液低温保存并加入肽聚糖冷冻胶囊的具体步骤为：

步骤一:制备预冷至-12℃的肽聚糖冷冻胶囊；

步骤二:将发酵液在4℃静置20分钟后，在超净台中按1颗/15min向发酵液中逐步加入步骤一得到肽聚糖冷冻胶囊4颗，边加入边轻轻摇动；

步骤三：将发酵液放置入20℃的培养箱静置20分钟；

步骤四：将发酵液在30℃培养箱中静置20分钟；

所述超声30s的具体步骤为：

S7：采用频率为10Khz且功率为5W/mL的超声波发酵液2s；

S8：采用频率为15Khz且功率为5W/mL的超声波发酵液3s；

S9：采用频率为20Khz且功率为5W/mL的超声波发酵液15s；

S10：采用频率为15Khz且功率为5W/mL的超声波发酵液5s；

S11：采用频率为10Khz且功率为5W/mL的超声波发酵液5s；

制备甘油和麦芽糖的混合物的过程为：

S12：将质量份数为10的水预热至60℃，将质量份数为1的麦芽糖缓慢加入到水中，边加边搅拌至麦芽糖完全溶解后冷却到室温后抽滤，得到第一混合溶液；

S13：将S12中得到的第一混合溶液与质量分数为1的甘油完全混合得到第二混合溶液，将第二混合溶液放置在37℃培养箱备用。