[发明专利]一种用于检测鼠源性成分的试剂盒和方法

说明书

本发明涉及包含SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.2所示引物对和SEQ ID NO.3所示探针的用于鼠源性成分检测的试剂盒，还涉及用于检测鼠源性成分的方法。本发明试剂盒及方法可以准确检测肉及肉制品中的鼠源性成分，检测快速、准确，成本低，特异性好，灵敏度高，有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于检测鼠源性成分的试剂盒和方法。

背景技术

近年来,食品安全问题日益突出，其中肉制品掺假现象十分严重，成为人们日益关注的焦点。一些不法商贩将相对廉价的肉类原料掺入到价格昂贵的肉制品中进行销售以谋取不当利益，从而严重侵犯了消费者的合法权益。更为严重的是，市面上出现的用来源不明的鼠肉冒充牛羊肉或掺杂到肉制品中出售，不仅影响肉类产品市场的正常运行，而且威胁消费者的身体健康和生命安全。老鼠多生活于潮湿脏乱的环境中，携带多种细菌病毒。死鼠肉极易腐烂而滋生细菌，一些死鼠体内还含有老鼠药等强力毒药成分。因此，一旦老鼠肉被混掺入食用肉类及肉制品，食用后会造成人体中毒，轻则恶心、呕吐，重则可能导致死亡。

目前，肉类掺假常见的检测技术有ELISA法、显微判定法、电子鼻法、质谱法等，但都存在灵敏度低、周期长、不能检测熟肉等缺点而未被广泛使用。PCR技术具有灵敏度高、操作简便、抗干扰能力强等优势，越来越多被用于动物源性成分检测。但至今尚没有鼠源性成分检测的国家标准或者行业标准，使得消费者乃至检验机构无标可依，无法可循，难以快速有效的进行检测。

公开号为CN 101768640 A的专利报道了一种鉴定食品中鼠源性成分的试剂盒，其仅能检测实验大鼠、小鼠及野生小鼠，无法检测其它常见鼠类，例如海狸鼠。

周如华(周如华等，实时荧光定量PCR检测羊肉制品中鼠源性成分[J]，中国法医学杂志，2014，6:534-537)报道了一种检测羊肉制品中鼠源性成分的方法，仅能检测小家鼠、褐家鼠、黄胸鼠，无法检测其它常见鼠类，而且检出限仅为1％。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测鼠源性成分的试剂盒和方法。

本发明提供了SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物对、SEQ ID NO.3 所示的探针。

本发明还提供了SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物对和SEQ ID NO.3所示的探针在制备检测鼠源性成分的试剂中的用途。

其中，所述试剂是检测肉及肉制品中鼠源性成分的试剂；所述鼠源性成分为海狸鼠、大鼠、小鼠、豚鼠、竹鼠和/或白腹鼠源性成分。

其中，它包括SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物对和SEQ ID NO.3 所示的探针。

其中，它还包括实时荧光PCR预混液。

其中，它还包括Taq DNA聚合酶、MgCl₂、dNTP和反应缓冲液。

其中，所述试剂盒的组成为：

PCR反应总体积为20μL时，

其余为无菌双蒸水；

其中，模板DNA的浓度为1ng/μL～100ng/μL；引物的浓度为10μmol/L；探针的浓度为10μmol/L。

本发明还提供了上述试剂盒在用于检测肉及肉制品中鼠源性成分中的用途。

本发明还提供了一种检测鼠源性成分的方法，它包括如下步骤：

(1)提取样本DNA：取待检样品，提取其中的DNA；

(2)基因扩增：用上述试剂盒对待检样品中的DNA进行扩增；