[发明专利]一种提高重组犬干扰素‑γ融合蛋白抗病毒活性的方法在审
申请号: | 201710584165.1 | 申请日: | 2017-07-18 |
公开(公告)号: | CN107177614A | 公开(公告)日: | 2017-09-19 |
发明(设计)人: | 朱升龙;吴云舟;朱明杰;赵伟;何国栋;其他发明人请求不公开姓名 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨紫霞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C07K19/00;C12N15/70;C12N1/21;C07K1/22;C07K1/16 |
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地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 重组 干扰素 融合 蛋白 抗病毒 活性 方法 | ||
1.一种重组犬干扰素-γ基因,其特征在于:其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1的重组犬干扰素-γ基因所编码的蛋白质,其特征在于:其氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。
3.含有权利要求1所述重组犬干扰素-γ基因的重组表达载体。
4.按照权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于:其为原核表达载体。
5.由权利要求3或4的重组表达载体所转化得到的重组菌株。
6.一种制备重组犬干扰素-γ的方法,包括以下步骤:
构建含有权利要求1所述重组犬干扰素-γ基因的重组表达质粒;培养用该重组表达质粒所转化的宿主细胞,得重组菌株;培养重组菌株,诱导重组蛋白的表达,分离并纯化所表达的重组蛋白。
7.按照权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的重组蛋白的分离和纯化包括以下步骤:
(1)将收集的菌体用磷酸盐缓冲液悬浮,破碎后0-4℃低温离心收集上清,利用Ni亲和柱和AKTA蛋白纯化系统进行蛋白粗提纯;
(2)将粗提纯的蛋白再利用AKTA系统进行分子筛的纯化,即得。
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