[发明专利]一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明根据生物活性指导分离的方法，采用PTP1B抑制剂筛选方法从洋槐花中分离获得一种新的萘醌苷类化合物3‑(3‑甲基丁烯‑3‑基)‑6,7‑二甲氧基‑萘醌‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，其IC₅₀值为1.126μM，可作为PTP1B抑制剂，用于开发抗糖尿病和抗肥胖症的药物。

技术领域

本发明属于天然药物化学技术领域，具体涉及从洋槐花中分离得到的一种具有PTP1B抑制活性的萘醌苷类化合物、其制备方法和作为PTP1B抑制剂的用途。

背景技术

蛋白酪氨酸磷酸酶1B（ProteinTyrosine Phosphatase-1B，PTP-1B）属于蛋白质酪氨酸磷酸酶家族，专一水解芳香族磷酸，如磷酸化酪氨酸（phosphotyrosyl，pTyr）残基上磷酸根的酶，通过对胰岛素受体或其底物上的酪氨酸残基去磷酸化作用，对胰岛素信号转导进行负调节，组织细胞中PTP-1B过表达都会降低PTK的活性，使胰岛素受体无法与胰岛素结合，进而引起胰岛素抵抗，最终导致2型糖尿病。因此，PTP1B也是胰岛素信号通路和瘦素信号通路共同的负调控因子，被公认为胰岛素增敏剂潜在的分子靶点。通过抑制PTP1B可以改善胰岛素抵抗，有助于提高外周组织对胰岛素的敏感性，在糖尿病和肥胖症的治疗中有着广阔的前景。然而，目前已知的PTP1B抑制剂几乎全部是从合成化学品中普筛出来并加以结构改造获得的，其中较好的抑制剂的IC₅₀值在20~50nM之间，但至今还没有一个候选化合物进入临床研究，相对于从合成品中发现的活性化合物，从植物中发现活性化合物，在药物后期的研究开发过程中有较高的成功机率。

洋槐花为蝶形花科槐树（Sophora japonica Linn.）的干燥花蕾，具有清热、凉血、止血等功效，常用于治疗便血、痔血、尿血、风热目赤等病症。现代药理研究表明，洋槐花具有清热解毒、舒张血管、改善血液循环、防止血管硬化、降低血压和抗氧化等作用。洋槐花资源丰富，在我国大部分地区均有分布，属于药食两用花卉。

发明内容

为了更好地开发和利用洋槐花资源，从中发现新的药理活性成分，本发明人考虑对洋槐花进行萃取分离，并采用生物活性指导分离的方法，利用PTP1B抑制剂模型对洋槐花活性部位进行分离、纯化，最终获得具有PTP1B抑制活性的化合物，并对该化合物结构进行鉴定，从而完成本发明。

具体而言，发明人首先对洋槐花的活性物质进行分离和萃取，即将干燥的洋槐花粉粹，用80%-95%乙醇回流萃取3次，每次2.5h，过滤后回收滤液，在45℃-55℃下干燥至无醇味，得到总酬膏；将总稠膏分为三部，分别获得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；根据生物活性指导分离的方法，采用PTP1B抑制剂筛选方法分别对石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行活性筛选，发现乙酸乙酯萃取物的活性最高；将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离，采用石油醚-丙酮作为流动相进行梯度洗脱，洗脱液经低温减压干燥分别获得四个馏分：A、B、C、D（TLC显示各馏分依次排列），同样采用PTP1B抑制剂筛选方法分别对四个馏分进行筛选，发现馏分B活性较高；再将馏分B经硅胶柱层析分离，采用石油醚-乙酸乙酯作为流动相进行梯度洗脱，洗脱液经低温减压干燥分别获得三个亚馏分：B-1、B-2、B-3（TLC显示各馏分依次排列），同样采用PTP1B抑制剂筛选方法分别对三个亚馏分进行筛选，发现亚馏分B-2活性较高；再将亚馏分B-2经Sephadex LH-20柱分离，用95%甲醇作为流动相进行洗脱，得到单体化合物（纯度为97.8%，黄色固体）。具体分离过程参见图1