[发明专利]一种肌酸激酶检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物制剂领域，具体是指一种肌酸激酶检测试剂盒。

背景技术

肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。肌酸激酶在临床诊断中有十分重要的意义，在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时，人的血清中肌酸激酶水平迅速提高，目前认为在心肌梗塞的诊断中测定肌酸激酶的活性比做心电图更为可靠。心肌梗死时，肌酸激酶在起病6小时内升高，24小时达高峰，3-4日内恢复正常。肌酸激酶因其具有重要的生理功能和临床应用价值已引起人们广泛的重视和深入的研究，临床上主要用于心肌梗死、病毒性心肌炎的辅助诊断。

目前检测肌酸激酶(CK)总活性的方法有比色法、酶偶联法、荧光法和生物发光法，其中比色法及酶偶联法更常用。酶偶联法多采用辅酶指示系统，如CN 101063111 B(2010.08.25)、CN 1904062 B(2010.11.24)、CN 1916623 B(2013.05.29)、CN 103173519 B(2014.07.02)、CN 104374905 B(2016.03.30)、CN 104357544 A(2015.02.18)。但是这些方案均存在不能有效消除内源性肌酸干扰，影响检测精度。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供一种肌酸激酶检测试剂盒，重复性好、准确度高、稳定性好，适合临床应用推广。

为实现上述目的，本发明的技术方案是包括有由试剂1和试剂2的液体双试剂，其中试剂1包括有以下组分：

磷酸盐缓冲液100mmol/L-200mmol/L，PH＝7.4-7.8；

肌酸酶20KU/L-40KU/L

肌氨酸氧化酶8KU/L-16KU/L

4-氨基安替比林1mmol/L-10mmol/L

色原1mmol/L-10mmol/L

过氧化物酶10KU/L-20KU/L

酶保护剂该酶保护剂为液体酶保护剂，其含量为1mL-3mL/100mL；或者酶保护剂为固体酶保护剂，其含量为单位为1g-3g/100mL；

防腐剂NaN₃ 0.6g/L-1.0g/L；

所述试剂2包括以下组分：

磷酸盐缓冲液100mmol/L-200mmol/L，PH＝6.5-6.9；

磷酸肌酸260mmol/L-410mmol/L

二磷酸腺苷1.5mmol/L-3.2mmol/L

激活剂

防腐剂NaN₃ 0.6g/L-1.0g/L。

进一步设置是所述的试剂1中的磷酸盐缓冲液的PH＝7.6；试剂2中的磷酸盐缓冲液的PH＝6.7。

进一步设置是该色原为3,5-二氯-2-羟基苯磺酸、N-乙基-(2-羟-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基-4-氟苯胺、N-(2-羟-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺、2,4,6-三碘-3-羟基苯甲酸、4-氯酚、2,4二氯酚或苯酚中的任意一种。

进一步设置是色原为2,4,6-三碘-3-羟基苯甲酸，其浓度为6mmol/L。

进一步设置是所述酶保护剂为果糖与表面活性剂的组合物，其中表面活性剂可选自脂肪醇聚氧乙烯(7)醚、月桂酸聚氧乙烯(9)酯、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、烷基酚聚氧乙烯(10)醚中的一种或多种。

进一步设置是酶保护剂为果糖和月桂酸聚氧乙烯(9)酯1:1质量比组合。

进一步设置是所述激活剂为醋酸镁与巯基试剂的组合物，其中巯基试剂选自N-乙酰半胱氨酸、巯基甘油、二硫苏糖醇、二硫赤癣糖醇、巯基乙酸、巯基乙醇、半胱氨酸中一种或几种组合。

进一步设置是所述激活剂为醋酸镁与N-乙酰半胱氨酸组合物，其中醋酸镁的浓度为10mmol/L-25mmol/L，N-乙酰半胱氨酸组合物浓度16mmol/L-30mmol/L。