[发明专利]一株海洋蜡样芽胞杆菌及其在水华鱼腥藻防治方面的应用

说明书

本发明属于环境微生物领域，具体涉及一种具有溶藻特性的海洋蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HY339及其在抑制水华鱼腥藻生长方面的应用，它的保藏编号是CGMCC No.14207。菌株HY339发酵液及发酵液粗提物对水华鱼腥藻(Anabaena flos‑aquae)的生长具有较强的抑制效果，且对菌株HY339的淡化培养并未影响其溶藻效果，有望开发新型水产抑藻菌剂并应用于淡水蓝藻水华的生物防治领域。

技术领域

本发明涉及环境微生物领域，一株具有分泌溶藻活性物质的海洋蜡状芽孢杆菌HY339(Bacillus cereus HY339)及其在淡水蓝藻水华鱼腥藻生物防治领域中的应用。

背景技术

当前阶段蓝藻水华的控制方法可分为物理、化学和生物方法。物理方法如超声波除藻、气浮除藻、过滤和机械清除等方法成本较高、费时费力、操作困难且往往治标不治本；化学方法包括化学药剂法、光化学降解法和电化学法等，是目前较为成熟的除藻技术，但化学方法容易污染环境、破坏生态系统，生物毒性大，容易造成药物残留和二次污染，且长期使用会使藻类产生抗药性。

所以，生物防控法越来越受到专家学者们的青睐。蓝藻水华的生物防控过程中，微生物的利用至关重要，尤其以具有溶藻特性的微生物对蓝藻水华的抑制发挥了重要作用。

水华鱼腥藻是引起水华蓝藻爆发的主要藻种之一，适应性强，就发生频率和范围来讲，是仅次于微囊藻的有毒水华蓝藻。对水华鱼腥藻生长的抑制研究非常具有学术和应用价值，本领域的学者们致力于筛选出对水华鱼腥藻的生长具有显著抑制效果的溶藻细菌，同时研究其具有溶藻活性的次生代谢产物，开发微生物溶藻制剂，应用于蓝藻水华问题的安全高效解决，对安全、经济、高效地控制和治理水华具有重要价值。

发明内容

为实现上述背景介绍中的问题，本发明提供了一株具有溶藻特性的海洋蜡样芽胞杆菌HY339(Bacillus cereus HY339)及其代谢产物在水华鱼腥藻生物防治中的应用。

本发明公开了一株具有溶藻特性的海洋蜡样芽胞杆菌HY339(Bacillus cereusHY339)，保藏编号为CGMCC No.14207。

进一步地，本发明提供了上述菌株HY339在水华鱼腥藻生态防治中的应用。

进一步地，本发明提供了上述菌株HY339的发酵产物在水华鱼腥藻生态防治中的应用。

进一步地，本发明提供了一种溶藻菌剂，所述溶藻剂中包含所述的菌株HY339。

进一步地，本发明提供了一种溶藻制剂，所述溶藻制剂中包含所述的菌株HY339的发酵产物，所述发酵产物为发酵液、发酵液浓缩物、发酵液粗提物或发酵液提取物。

优选地，菌液发酵条件为，菌株HY339接种于pH7.0的灭菌LB培养基中，25℃、150rpm条件下发酵5天得到菌株HY339发酵液，其中，LB培养基使用人工海水配制。

优选地，发酵产物萃取剂为乙酸乙酯混合5％体积比的丙酮，萃取体系中乙酸乙酯-丙酮混合液与发酵液的体积比为1:1，混合后进行震荡5min，分离出的上层乙酸乙酯-丙酮混合液即为菌株HY339发酵液萃取液；萃取液以旋转蒸发仪蒸干后即为发酵液粗提物。

本发明所述的菌株HY339是海水里分离出来的细菌，一般而言，海水细菌难以直接用于淡水水华防治。但本发明通过淡化培养发现，该菌可以适合低盐度生长，且可在淡水条件下进行溶藻活动。

具体的菌株HY339的淡化培养方法如下：

①发酵培养所述的菌株HY339；

②取发酵液接种于不同盐度培养基进行第二次发酵；

③以不同盐度发酵液进行溶藻实验。