[发明专利]一种6-姜烯酚的提取纯化方法

说明书

本发明提供一种6‑姜烯酚的提取纯化方法，以生姜、干姜为原料，将所述原料切碎/（或粉碎后）采用70%乙醇，40‑55℃水浴浸提；过滤药渣后，提取液经减压蒸馏得浓缩液；浓缩液分别经石油醚萃取去除杂质、乙酸乙酯萃取6‑姜烯酚成分；上述萃取液除去溶剂后，乙酸乙酯萃取部分经硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯（6:1~2:1）梯度洗脱，分离收集R_f=0.38（石油醚:乙酸乙酯=3:1）的组分，得分离6‑姜烯酚粗品。6‑姜烯酚粗品进一步经薄层制备层析分离得6‑姜烯酚纯品，纯品经¹HNMR和¹³CNMR表征。该方法操作简单，材料成本低廉，节约时间，纯度好。所得6‑姜烯酚产品可用作含姜、姜烯酚的医药制剂、药理研究、化妆品、日化品等的质量控制的标准品。

技术领域

本发明属于天然药物、中草药中活性成分提取及纯化领域。本发明从生姜中提取和纯化6-姜烯酚。

背景技术

姜是姜科植物姜的鲜嫩茎。生姜药食两用，能解表散热，温中止呕。在《本草纲目》中有记载，生姜能够治疗“疟疾寒热(脾胃聚痰，发为寒热)、寒热痰嗽、霍乱转筋，入腹欲死、胸胁满痛(心胸、胁下，硬痛胀满)、大便不通、湿热发黄、满口烂疮、牙齿疼痛、中药毒、刀斧伤、闪扭手足、跌打损伤、腋下狐臭、赤白癜风、两耳冻疮、诸毒痔漏，久不结痂”。(赵文竹,张瑞雪,于志鹏,等.生姜的化学成分及生物活性研究进展[J].食品工业科技,2016,(11):383-389.)。生姜提取物广泛应用于制药、化妆品、日化品中。6-姜烯酚是生姜中的活性成分之一，分子结构如式Ⅰ。它具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等生物学活性。[周萍，彭咏波，李萍，6-姜烯酚抗肿瘤机制研究进展，中南药学，2012，10(7)：536-537；Na JY，Song K，Lee JW，KimS，Kwon J，Pretreatment of 6-shogaol attenuates oxidative stress andinflammation in middle cerebral artery occlusion-induced mice，EUROPEANJOURNAL OF PHARMACOLOGY，2016，788:241-247。]

现有技术中，6-姜烯酚的提取纯化方法主要有以下几种：

(1)将姜超临界流体萃取物(6-姜烯酚的含量约为2.5％)与含乙醇的酸水液混合后加热回流，再分离、精制。酸水反应处理后提取物中6-姜烯酚的含量可达20％。[李萍；彭咏波；马江；齐炼文；刘慧；成小兰；一种6-姜烯酚的制备方法，申请号：CN200910232593.3。]

(2)姜超临界流体萃取物或干姜提取物经含乙醇的酸水加热回流提取，回收乙醇，酸水液用乙酸乙酯萃取，减压回收乙酸乙酯得到萃取后浓缩物，浓缩物过硅胶色谱柱、用石油醚和乙酸乙酯梯度洗脱，收集洗脱液浓缩，即得。硅胶柱层析分离得到的姜烯酚类组合物，含量可达60～65％。[齐炼文；李萍；马江，一种姜烯酚提取物的制备方法及其医药用途，申请号：CN201110148248.9]。

(3)从天堂椒中提取分离6-姜烯酚的方法。原料天堂椒粉碎，采用亚临界萃取，得油浸膏；将油浸膏采用乙醇溶解，然后采用溶剂萃取，浓缩至浸膏；采用柱分离，根据薄层斑点，收集含有6-姜烯酚的洗脱液，浓缩，放置结晶。所获粗品进一步重结晶，干燥后即得6-姜烯酚。[肖红；王晓莹；张瑜；肖金霞；郭文华；一种天堂椒的用途及从天堂椒中提取分离6-姜烯酚的方法，CN201611104828.7].

(4)以生姜95％乙醇提取物用石油醚脱脂,乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯相过D4020型大孔吸附树脂,依次用25％、50％、75％乙醇溶液洗脱得组分FrA和FrB。FrB以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(12：10：15：10,v/v/v/v)为溶剂系统,经高速逆流色谱HSCCC-D1200分离得到组分6-姜烯酚。[乔庆亮，生姜中酚类化合物的分离制备研究，硕士学位论文，浙江工商大学,杭州市，2011。]