[发明专利]抗菌和可循环利用的细胞捕获装置及其循环方法有效
申请号: | 201710592843.9 | 申请日: | 2017-07-19 |
公开(公告)号: | CN107523472B | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 王本;惠兰兰;苏逸 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12N5/09 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 郑海峰 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 捕获 细胞捕获装置 可循环 抗菌 释放 纳米氧化锌材料 循环肿瘤细胞 个性化治疗 纳米氧化锌 氧化锌材料 细胞 技术平台 弱酸溶液 生物分析 使用环境 无菌处理 细胞捕获 循环利用 早期诊断 装置结构 活化 基底 可用 整合 细菌 癌症 诊断 感染 保留 损害 | ||
1.一种抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于由如下步骤制备:
1)在模板上利用磁控溅射的方法长上纳米氧化锌晶种层,将有晶种层的模板与作为生长液的溶液孵育得到纳米氧化锌层;所述生长液是硝酸锌和乌洛托品的混合溶液,所述生长液中两种溶质浓度都是10mM;将生长有纳米氧化锌层的模板作为后续处理的装置;
2)对步骤1)所得的装置进行等离子蚀刻,之后,将装置浸泡体积分数为4%的(3-氨丙基)三甲氧基硅烷的乙醇溶液,室温孵育1小时,清洗后将装置浸泡在乙腈配置的10mM的N,N’-二琥珀酸亚胺碳酸酯溶液中,室温孵育10分钟,清洗,然后,装置加入用磷酸缓冲液配制的10 µg/mL的neutravidin,室温孵育1小时,清洗,之后加入用磷酸缓冲溶液配置的1%BSA稀释的10µg/mL 生物素连接的特异性抗体,室温孵育1小时,清洗,每次所述的清洗都是浸泡在PBS溶液中,放在摇床上5分钟;最后,用PBS配制的5%的BSA溶液进行封闭,室温1小时来减少血细胞非特异性粘附,得到抗菌和可循环利用的细胞捕获装置;所述的特异性抗体为anti-EpCAM、anti-vimentin抗体或其混合。
2.根据权利要求1所述的抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于所述的特异性抗体为anti-EpCAM、anti-vimentin抗体混合,anti-EpCAM抗体和anti-vimentin抗体的质量比为1:1。
3.据权利要求1所述的抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于所述的模板为利用MEMS技术紫外光刻获得的PDMS基底模板。
4. 根据权利要求3所述的抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于所述的PDMS基底模板上设置高80µm,直径160µm,周期分布的圆柱,任意相邻的两圆柱的圆心间距为240µm。
5.根据权利要求3所述的抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于所述的PDMS基底模板的长为3cm,宽为2cm。
6.根据权利要求1所述的抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于所述的步骤1)孵育的温度为90℃,时间为48h。
7. 根据权利要求1所述的抗菌和可循环利用的细胞捕获装置,其特征在于所述的步骤1)中的磁控溅射条件为在120°C 条件下作用 30 min,晶种层厚度为400-600nm。
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