[发明专利]REPS1在制备儿童I型糖尿病诊断产品中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及儿童I型糖尿病诊断、预测预后领域，更具体地，本发明涉及以检测REPS1异常为手段的儿童I型糖尿病诊断、预测预后方法。

背景技术

I型糖尿病(T1DM)为在遗传基础上由环境因素激发的、自身免疫介导的以胰腺β细胞受损为特征的自身免疫性疾病，是一种由于胰岛素缺乏或作用不足引起的能量代谢疾病。通常在儿童、少年、青年时期被诊断，发病风险最高的年龄段是10-14岁，青少年以后，发病率下降。儿童I型糖尿病以往多指小于15岁发生的糖尿病，由于WHO(世界卫生组织)已经儿童定义为0-18岁，因此儿童糖尿病应指小于18岁发生的糖尿病。儿童1型糖尿病的临床表现为多尿、多饮、多食及消瘦。儿童1型糖尿病比成人糖尿病重，起病较急，不易早期发现，胰岛β细胞的功能可出现明显下降甚至发展为衰竭，早期并发症即可出现，如糖尿病酮症甚至酸中毒，如处理不及时或不当，可能危及生命。I型糖尿病确切发病机制尚未完全阐明，目前认为是遗传、免疫和环境因素共同作用所致。

高通量测序技术(High-throughput sequencing)是指能够一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，每一次序列测定的读长一般较短的测序技术。高通量测序技术是对传统测序一次革命性变革，随着2005年罗氏的454测序仪及2006年Solexa测序仪出现后飞速发展，2009年左右高通量测序技术在国内兴起。高通量测序类型分为多种，基因芯片、基因深度测序(genomere-sequencing)、转录组深度测序(transcriptome re-sequencing又称RNA-Seq)等。

细胞的功能是从基因的表达开始的，转录组是指某一时间细胞内所有基因转录而来的RNA总称。通过高通量测序技术可获得基因表达的RNA水平有关信息，可以揭示基因表达与一些生命现象之间的内在联系。

高通量测序技术的快速发展和应用，为儿童I型糖尿病发病机理的研究提供了更加全面和快速的分析手段，也为儿童I型糖尿病的进一步治疗方案提供崭新思路。深入研究儿童I型糖尿病相关基因的调控机制，有助于了解儿童I型糖尿病的遗传分子机制，为寻找新的药物提供理论依据。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种通过检测REPS1基因或蛋白表达差异来诊断儿童I型糖尿病的方法。

本发明的目的之二在于提供一种通过检测REPS1基因或蛋白表达差异来预测儿童I型糖尿病预后的方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了检测REPS1基因或REPS1蛋白的产品在制备儿童I型糖尿病诊断工具中的用途。

本发明还提供了检测REPS1基因或REPS1蛋白的产品在制备预测儿童I型糖尿病预后工具中的用途。

进一步，所述检测REPS1基因或REPS1蛋白的产品包括检测REPS1基因或REPS1蛋白的表达水平的产品。所述产品包括能够结合REPS1基因的核酸或者能够结合REPS1蛋白的物质(例如抗体)。所述核酸能够检测REPS1基因的表达水平；所述物质能够检测REPS1蛋白的表达水平。

本发明的检测REPS1基因的产品可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该产品可以定性地、定量地、或半定量地实施分析。

包含在上述产品中的核酸可以通过化学合成来获得，或通过从生物材料制备含有期望核酸的基因，然后使用设计用于扩增期望核酸的引物扩增它来获得。

进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(Amplification Refractory Mutation System，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。

上面所述的核酸包括扩增REPS1基因的引物，产品中包括的引物可以通过通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。