[发明专利]一种反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法

说明书

本发明公开了一种反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以体积百分含量为40‑44％的甲醇水溶液为流动相，且1L该流动相中添加4‑6mL的三乙醇胺作为手性拆分试剂。本发明提供的方法可有效将雷替曲塞和其对映异构体分离，分离度大于1.5。本发明方法基于反相液相色谱，成熟通用，不存在现有技术中正相液相色谱和毛细管电泳的缺陷。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法。

背景技术

雷替曲塞，化学名N-[5-[N-甲基-N-[(2-甲基-3，4-二氢-4-氧代-6-喹唑啉基)-甲基]氨基]-2-噻吩甲酰基]-L-谷氨酸，商品名拓优得(Tomudex)，是一种特异性的胸苷酸合成酶抑制剂，用于治疗晚期结直肠癌。临床试验表明本品比常规一线治疗药物5-氟尿嘧啶毒性小、活性高、使用方便，在英国等西欧国家已经成为晚期结直肠癌一线治疗药物。

雷替曲塞的化学结构式如下：

雷替曲塞原料及其制剂中，常常会有一定量的对映异构体存在，化学结构式如下：

现有技术主要通过两种方法检测雷替曲塞及其制剂中的对映异构体：

(1)正相液相色谱法：该方法使用正己烷和异丙醇为洗脱溶剂，由于正己烷极易挥发，导致实验室弥漫着正己烷的气味，非常难闻；正相色谱的色谱峰保留时间受温度影响较大，特别是在夏天时，如果流动相瓶的上方就有空调出风口，常会导致保留时间明显漂移；

(2)毛细管电泳法：众所周知，毛细管电泳重现性差，不适合用于药品质量控制。

大家之所以不用反相高效液相色谱，就是因为该对映异构体在反相色谱中极难与雷替曲塞达到基线分离。而反相液相色谱法非常成熟，广泛用于药品质量控制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法。

本发明通过下面的技术方案得以实现：

一种反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以体积百分含量为40-44％的甲醇水溶液为流动相，且1L该流动相中添加4-6mL的三乙醇胺作为手性拆分试剂。

优选地，流动相为体积百分含量为42％的甲醇水溶液，1L甲醇水溶液中添加5mL的三乙醇胺。

优选地，方法包括如下色谱参数：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶(C18)色谱柱；

流动相：体积百分含量为42％的甲醇水溶液，1L甲醇水溶液中添加5mL的三乙醇胺；

洗脱模式：等度洗脱；

柱温：33-37℃；

检测波长：226-230nm。

优选地，柱温优选35℃。

优选地，检测波长优选228nm。

优选地，所述色谱柱的规格优选长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm。

优选地，色谱柱优选Waters XBridge C18柱。

本发明的优点：

本发明提供的方法可以有效将雷替曲塞和其对映异构体分离，分离度大于1.5。本发明方法基于反相液相色谱，成熟通用，不存在现有技术中正相液相色谱和毛细管电泳的缺陷。

附图说明