[发明专利]一种液体酶制剂及制备方法

说明书

本发明公开了一种液体酶制剂及制备方法。本发明主要解决谷氨酰胺转氨酶液体制剂在常温下难保存的技术问题，其技术方案为：该酶制剂为谷氨酰胺转氨酶EC2.3.2.13的液体制剂，各组分含量为：谷氨酰胺转氨酶液体制剂的酶活为50‑500u/ml、丙三醇或山梨糖醇重量体积百分含量50‑70％、食品防腐剂重量体积百分含量0‑0.5％、pH调节剂补齐到100％体积，所述酶制剂中至少添加L‑半胱氨酸及其盐、小麦蛋白水解物中的一种，所述L‑半胱氨酸及其盐的重量体积百分含量为0‑0.15％，所述小麦蛋白水解物的重量体积百分含量为0‑1％。其制备方法为：酶液纯化、混合、除菌、灌装、得到成品。本发明实现了酶制剂常温下保持6个月酶活80％以上、性状稳定、无微生物腐败、使用效果良好。

技术领域

本发明公开了一种液体酶制剂及制备方法，具体涉及到一种可常温存储、性状稳定、酶活保存率超过80％的谷氨酰胺转氨酶(EC.2.3.2.13)液体制剂及制备方法，属于酶制剂领域和食品添加剂领域。

背景技术

谷氨酰胺转氨酶(EC.2.3.2.13，英文全称Amine γ-glutamyl-transferase，英文简称 Transglutaminase，缩写名为TG)是一种蛋白交联酶，能以蛋白质肽链中赖氨酸的ε-氨基为酰基受体，催化蛋白质分子内和分子间形成ε-(γ-谷氨酰基)赖氨酸的异型肽键，改善蛋白质的乳化性、流变性、溶解性、起泡性等多种性质，赋予蛋白质特有的质构特性和粘合性，提高产品的色香味，具有很大的市场价值。

谷氨酰胺转氨酶最早是由Clarke等人从豚鼠肝脏中分离得到。1989年由日本Amano 公司的Ando等人发明了微生物发酵法生产谷氨酰胺转氨酶，1997年由日本味之素公司实现了商业规模化生产，2001年我国将谷氨酰胺转氨酶正式列为食品添加剂。目前全球范围内主要发酵生产厂家为日本味之素公司，谷氨酰胺转氨酶产品品牌为Acvita，国内主要生产企业有上海青瑞食品科技有限公司，济南青瑞生物科技有限公司、泰兴市东圣食品科技有限公司、泰兴市一鸣生物制品有限公司、河南仰韶生化工程有限公司等企业，产品为固体粉末型酶制剂，并由上海青瑞食品科技有限公司率先使用立体真空包装，日本味之素公司至今采用粉末充氮包装。

目前谷氨酰胺转氨酶粉末制剂虽然已经实现规模化生产，并在食品加工行业获得广泛应用。但在生产、运输、贮存、应用中还存在很多问题：

1)生产成本：由于在谷氨酰胺转氨酶生产过程过程中，首先获得的发酵液体，酶液精制过程中，需要沉淀，干燥，粉碎等加工步骤，工序繁杂，导致生产成本上升；

2)安全防护：在生产和使用过程中谷氨酰胺转氨酶粉末制剂，容易扩散，导致车间环境变恶劣，设备难以清洗；操作空间充斥粉尘，防护困难，酶粉末被人体吸入后，引发强烈过敏性反应，严重损害操作人员的呼吸道器官，出现高烧、肺炎、休克等症状，对操作人员健康产生很大危害，目前为止，工厂里已经多次发生谷氨酰胺转氨酶引起咳嗽、发烧等过敏变态反应症状的事件；

3)包装问题：谷氨酰胺转氨酶粉末酶制剂采用真空包装，在抽真空时粉末容易吸入设备，造成一定损失；如果酶制剂包装封口不严，产生漏气现象，则容易发生吸潮、结块、酶活降低等现象，若采用充氮包装，由于充氮操作繁琐并导致大量扬尘，且生产成本大幅增加；

4)应用方面：众所周知，谷氨酰胺转氨酶只有在水中溶解状态才能发挥作用。在生产应用中，粉末制剂存在二次溶解过程，大大减少了酶发挥作用的时间。并且经常出现加水没完全溶解的现象或者直接添加粉末容易出现分布不均匀，同时使用设备进行滚揉操作时，容易黏连到设备上，导致粉末制剂利用率降低、应用效果差，从而不得不增加谷氨酰胺转氨酶粉末制剂用量；