[发明专利]一种白柳枝叶中水杨甙的高收率提取方法

说明书

技术领域

本发明属于生物提取领域，具体涉及一种白柳枝叶中水杨甙的高收率提取方法。

背景技术

水杨甙，英文名称为D(-)-Salicin，别名为D-(-)-水杨苷，分子式为C13H18O7，CAS号为138-52-3，分子量：286.28，熔点：199-202℃。

水杨甙为白色结晶；味苦；比旋光度【α】厍-45.6°（0.6克/100厘米³无水乙醇）；可溶于水，易溶于沸水，难溶于乙醇(1:90)，不溶于醚或氯仿，但能溶于碱溶液、吡啶或冰醋酸中。其水溶液呈中性反应，分子中无游离酚羟基，属于酚苷类化合物。经稀酸或苦杏仁酶水解，可生成葡萄糖和水杨醇。水杨醇的分子式为C7H8O2；为斜方无色针晶；熔点86～87℃;热至100℃升华；可溶于水、苯，易溶于乙醇、醚、 氯仿；遇硫酸呈红色。

水杨甙广泛存在于杨柳科植物白柳的枝，叶，根皮中，其中白柳皮中含量最高。

药理作用：1. 治疗发热，感冒和感染 作为“天然阿斯匹林”，水杨甙被用于治疗轻微发热，感冒，感染（流行性感冒），急性和慢性风湿不适，头痛和因发炎导致的疼痛。阿斯匹林（乙酰水杨酸），作为水杨甙的合成代替品，具有潜在的对胃肠危险副作用。作为其天然构型，水杨甙可无害地通过肠胃系统，在血液和肝脏中转化为水杨酸。转化过程需要数小时，因此结果不会立即被人体感觉到，但是一般功效会持续数小时。 2. 水杨甙在减轻关节炎痛和腰背疼痛方面，水杨甙的止痛能力通常生效较慢但比普通阿斯匹林产品效果持续的时间长。一次试验发现一类含有100ng水杨甙的草药化合物制品在连续服用两个月后可有效提高对关节炎患者的止痛能力。另一试验发现每天摄入1360mg白柳枝叶提取物（含有240mg水杨甙）两星期后可对治疗关节部位疼痛和/或关节炎有更好的功效。使用高剂量白柳枝叶提取物可能也有助于缓解腰背疼痛。一次持续四星期的试验发现含有240mg水杨甙的白柳枝叶提取物可有效减轻腰背疼痛的恶化。

目前，水杨甙的制备方法主要有化工合成制备和从白柳皮或白柳枝叶中提取。

化工合成方法制备水杨甙，用到各种有机中间体，原料不容易得到，还用到一些有机溶剂，价格高，所以整体成本较高，另外产品中有溶剂残留都不容易达标，且环境污染严重。

目前，从白柳枝叶中提取水杨甙的主要方法有生石灰水、甲醇、乙醇提取法，但是这些方法提取出来的水杨甙收率低，灰分高，纯度低，导致其产品价格低。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种白柳枝叶中水杨甙的高收率提取方法，本发明提取方法原料易得，从来源丰富的白柳枝叶中提取，且得到的产品水杨甙收率高、纯度高，收率＞1.5%，纯度＞98％。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种白柳枝叶中水杨甙的高收率提取方法，包括以下步骤：

（1）粉碎：将白柳枝叶紫外线辐照处理15～30min，然后气流粉碎，过400～500目筛，得到白柳枝叶细粉；

（2）预处理：将白柳枝叶细粉置于液氮中在超低温下快速冷冻3～5min，迅速取出后微波解冻2～4min，如此冻结-解冻循环处理2～3次；

（3）提取、浓缩：按照料液比1:10～15将白柳枝叶细粉加入体积分数为80%的乙醇溶液中，先低频超声波处理15～20min，再高频超声波处理5～10min，再中频超声波处理10～15min，然后回流提取1.5～2.5h，滤出提取液，按照料液比1:8～12将滤渣加入体积分数为95%的乙醇溶液中，高压脉冲电场处理15～30s，回流提取1～2h，滤出提取液，合并两次提取液，浓缩至相对密度为1.1～1.3；

（4）吸附分离：步骤（3）制得的浓缩液中加入相当于浓缩液质量3～6倍的水，充分搅拌均匀，离心分离，取上清液以1～2BV/h的流速加入到径高比为1:7～9的大孔吸附树脂柱上进行吸附，吸附后先用2～4BV的去离子水冲洗树脂，再用3～5BV的体积分数为50～80%的乙醇溶液以1～3BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液；

（5）脱色、浓缩结晶：向洗脱液中加入相当于洗脱液质量3～6%的活性炭，回流搅拌脱色3～5h，冷却过滤，滤液浓缩至相对密度为1.4～1.8，冷却至2-4℃，结晶24～36h；

（6）离心、重结晶：将结晶粗品离心分离，沉淀粗品用水重结晶3～5次；

（7）离心：将重结晶好的物料离心分离，沉淀用水淋洗，得水杨甙精品湿品沉淀；

（8）干燥：将水杨甙精品湿品沉淀在60～70℃的温度下干燥24-48h，得水杨甙成品。