[发明专利]一种含氰基双光子荧光染料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种含氰基双光子荧光染料，其结构通式如(I)所示：

其中：上述R表示氢、烷基、羟烷基或醚基。

2.根据权利要求1所述的一种含氰基双光子荧光染料，其特征是，R为氢、C_1-12的烷基、C_1-12的羟烷基或乙醚基。

3.根据权利要求2所述的一种含氰基双光子荧光染料，其特征是，R为乙基。

4.权利要求1所述的一种含氰基双光子荧光染料的制备方法，其特征是，包括步骤如下：

先将咔唑卤代反应在氮上引入R基生成取代咔唑，再使取代咔唑与N,N-二甲基甲酰胺发生维尔斯迈尔反应得到3,6-二甲酰基-9-乙基咔唑中间体，将3,6-二甲酰基-9-乙基咔唑中间体与(4-氰基苄基)亚磷酸二乙酯发生迈克尔加成反应生成氰基双光子荧光染料。

5.根据权利要求4所述的一种含氰基双光子荧光染料的制备方法，其特征是，所述的维尔斯迈尔反应是先在0℃向部分N,N-二甲基甲酰胺中滴加三氯氧磷搅拌至待有白色沉淀生成后，将溶解在另一部分N,N-二甲基甲酰胺中的取代咔唑加入到其中，升温至100℃，搅拌反应20-35h。

6.根据权利要求5所述的一种含氰基双光子荧光染料的制备方法，其特征是，N,N-二甲基甲酰胺、三氯氧磷及取代咔唑的物质的量比为36～39:18～19.5:1。

7.权利要求1-3任一项所述的含氰基双光子荧光染料在对活细胞染色进行荧光成像中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征是，所述的活细胞选活性Hela细胞。