[发明专利]G-四联体DNA酶在硫离子超微弱化学发光检测中的应用

说明书

本发明属于检测技术领域，提出G‑四联体DNA酶在硫离子超微弱化学发光检测中的应用，所述G‑四联体DNA酶具有过氧化物酶催化活性。本发明还提出一种应用G‑四联体DNA酶的硫离子超微弱化学发光检测方法。本发明提出的基于超微弱化学发光法的硫离子快速检测方法，建立、完善和发展了硫离子污染物的生物传感分析方法，不仅可为环境健康风险评价提供参考，同时开发一种新的快速、高灵敏、低成本的检测方法，对完善现有检测技术手段具有重要意义和较好的应用价值。

技术领域

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种用于硫离子的化学发光检测方法。

背景技术

环境中污染物直接影响着人类赖以生存的生态环境，威胁着人类的健康。环境污染物的监测及其防治已成为国家加快现代化步伐，坚持可持续发展战略的重要环节，而对工业污水中污染物的检测是此环节中的一个关键。近年来，含硫污水的排放对环境体系、环境生态环境造成了严重的后果，水体含有的硫化物不仅直接影响人体的健康，还会和水体或空气中的某些物质发生化学反应，生成H₂S、SO₂等有害气体，不但严重污染大气，还会造成酸雨等一系列较严重的污染。为此，对含硫废水进行了分析检测，对严格控制含硫废水以低标排放具有重要意义。

研究表明，含硫化合物在自然界中存在形式很复杂、试样来源的不同及其不同样品间含硫量的差异巨大，很难采用一种单一的测定方法。到目前为止，应用仪器分析方法如荧光分光光度法、紫外可见分光光度法、离子选择电极法、离子色谱法等可以实现硫离子的高灵敏、选择性检测。但是由于在工农业生产及其环保监测中，要求仪器要反应迅速，并且能连续、现场测定，而采用大型色谱仪器检测法不能满足野外现场检测的要求，限制了其在污水硫离子检测中的应用。因此，探寻一种更加快速、简单、准确、灵敏、高效的检测硫离子的方法具有重要的意义和研究价值。

超微弱化学发光法具有样品制备周期短、检测快速、样品用量少、响应值强等优点，是一种比较理想的硫离子污染物快检方法。同时，随着对DNA认识的深入，科研工作者发现具有G-四联体结果的DNA可以与hemin分子结合，形成G-四联体/hemin复合物，被称之为G-四联体DNA酶，该DNA酶具有极强的催化活性，能够催化双氧水氧化鲁米诺产生化学发光(Kosman,J.,Juskowiak,B.,2011.Peroxidase-mimicking DNAzymes for biosensingapplications:A review.Anal.Chim.Acta 707,7-17)。基于此性质，G-四联体DNA酶已被广泛用于生物传感分析领域。但是到目前为止，尚未有基于G-四联体DNA酶对硫离子污染物进行超微弱化学发光检测的研究报道。

发明内容

针对本领域的不足之处，本发明的目的在于提供G-四联体DNA酶在硫离子超微弱化学发光检测中的应用。

本发明的第二个目的是提出一种应用G-四联体DNA酶的硫离子超微弱化学发光检测方法。

实现本发明上述目的的技术方案为：

G-四联体DNA酶在硫离子超微弱化学发光检测中的应用，所述G-四联体DNA酶具有过氧化物酶催化活性。

其中，所述G-四联体DNA酶DNA的序列为PW17，PS2.M，PS2.M2所示的序列中的一种。

具体采用的DNA粉末可以为PW17DNA，其核苷酸序列为：GGGTAGGGCGGGTTGGG。

实际应用中，可使用其它具有连续G序列的DNA序列进行替换，例如:

PS2.M:GTGGGTAGGGCGGGTTGG；

PS2.M2:GGGTAGGGCGGGTTGGGT。

一种应用G-四联体DNA酶的硫离子超微弱化学发光检测方法，包括如下步骤：