[发明专利]通过沉默ARPC4基因来抑制人结直肠癌细胞迁移的siRNA及其应用

说明书

本发明公开了一种通过沉默ARPC4基因来抑制人结直肠癌细胞迁移的siRNA及其应用。siRNA为siRNA496或siRNA538或siRNA679。本发明方法利用siRNA沉默ARPC4基因，再采用western blotting方法、CCK‑8法、流式细胞术和Transwell检测ARPC4基因对结直肠癌细胞迁移能力的变化，siRNA能够有效下调人结直肠癌SW620细胞中ARPC4基因的表达，减弱细胞的迁移侵袭，因此，通过siRNA特异性干预ARPC4基因的表达，使得ARPC4基因成为基因治疗结直肠癌的一个新靶点。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种通过沉默ARPC4基因来抑制人结直肠癌细胞迁移的siRNA及其应用。

背景技术

结肠直肠癌(carcinomaofcolonandrectum)胃肠道中常见的恶性肿瘤，早期症状不明显，随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状，晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。其发病率和病死率在消化系统恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌，严重危胁人类的身心健康，在癌症中的发病率约为9.7％。

肿瘤细胞的侵润性受肿瘤—基质相互作用的调控，在结直肠癌中，Arp2/3复合体在基质细胞附近表达，它的形成提高了基质细胞与成瘤细胞之间的运动性，进而为这两种细胞的侵润性提供更适合的环境。

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体是细胞骨架的重要组成部分，能够促进新微丝核化，广泛参与细胞形状的维持、细胞运动、胞质分裂和细胞移动等功能，ARPC4与ARPC2构成该复合体的中心，在该复合体的生物学功能上扮演重要角色。在胰腺癌，结直肠癌等多种癌细胞中异常高表达。ARPC4是arp2/3复合体的组成亚基之一，它具有控制肌动蛋白(actin)在细胞内的成核过程，与下游基因产生融合蛋白以及影响胰腺癌细胞的迁移等作用。但目前未见采用siRNA沉默SW620细胞系中的ARPC4基因来抑制其迁移的相关报道。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本发明提供一种通过沉默ARPC4基因来抑制人结直肠癌细胞迁移的siRNA及其应用，通过siRNA沉默ARPC4基因的表达，可有效抑制人结直肠癌细胞的侵袭力。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种通过沉默ARPC4基因来抑制人结直肠癌细胞迁移的siRNA，该siRNA为siRNA496或siRNA538或siRNA679；

siRNA496Sense：5＇-GAGCAGAGAACUUCUUUAUTT-3＇(SEQ ID No:1)；

siRNA496Antisense：3＇-AUAAAGAAGUUCUCUGCUCTT-5＇(SEQ ID No:2)；

siRNA538Sense：5＇-GGUAUGAUAUCAGCUUUCUTT-3＇(SEQ ID No:3)；

siRNA538Antisense：3＇-AGAAAGCUGAUAUCAUACCTT-5＇(SEQ ID No:4)；

siRNA679Sense：5＇-GCUGAAGAGUUCCUUAAGATT-3＇(SEQ ID No:5)；

siRNA679Antisense：3＇-UCUUAAGGAACUCUUCAGCTT-5＇(SEQ ID No:6)。

进一步地，siRNA所作用的结直肠癌细胞系为HT-29、HCT-116、SW620或SW-1116。

进一步地，结直肠癌细胞系为SW620。

上述siRNA在制备抑制人结直肠癌细胞迁移药物中的应用。

本发明的有益效果为：