[发明专利]植物乳杆菌的冷冻保藏方法

说明书

本发明公开了一种植物乳杆菌的冷冻保藏方法，其特征在于：在预定冷冻保藏条件下，采用预定保护剂对植物乳杆菌进行冷冻保藏，并在使用植物乳杆菌时采用预定解冻条件进行解冻，其中，预定保护剂由质量体积百分比为10％～30％的海藻糖溶液、质量体积百分比为10％～30％的蔗糖溶液、质量体积百分比为10％～25％的脱脂乳溶液以及体积百分比为10％～30％的甘油溶液等体积混合制备而成，采用这样的冷冻保藏方法，可最大程度上降低植物乳杆菌的低温冷冻的损伤和死亡，提高植物乳杆菌存活率和活力，从而大大提高发酵效率、节约成本以及缩短发酵周期。

技术领域

本发明涉及一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的冷冻保藏方法，属于微生物技术领域。

背景技术

超低温冷冻保藏是实验室乳酸菌菌种保藏最直接、最简单、最常用的方法之一，把需要保存的菌种离心重悬新的培养基后加入合适的保护剂混匀后分装到冻藏管中，放入－80℃超低温冰箱保藏。超低温冷冻保藏法具有保存费用低、不容易发生变异、操作简单、保存时间长等优点，超低温冷冻保藏方法在菌种保藏中非常值得推广。

虽然低温冷冻保藏有很多优点，但也会对乳杆菌细胞造成一定的生理损伤，降低细胞存活率。针对乳酸杆菌冷冻干燥生理损伤机制及保护策略的研究，一直是乳酸杆菌冷冻干燥研究的重点，国内外开展了大量的研究工作，然而对乳杆菌的低温冷冻保藏方法的研究还很少，尤其是针对植物乳杆菌的保藏方法的研究更少。由此可见，研究植物乳杆菌的最佳冷冻保藏方法是非常有必要的。

发明内容

本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种植物乳杆菌的冷冻保藏方法。

本发明提供了一种植物乳杆菌的冷冻保藏方法，具有这样的特征，包括：在预定冷冻保藏条件下，采用预定保护剂对植物乳杆菌进行冷冻保藏，并在需要使用时采用预定解冻条件进行解冻，其中，预定保护剂由等体积的海藻糖溶液、蔗糖溶液、脱脂乳溶液以及甘油溶液混合制备而成，海藻糖溶液的质量体积百分比为10％～30％，蔗糖溶液的质量体积百分比为10％～30％，脱脂乳溶液的体积百分比为10％～25％，甘油溶液的体积百分比为10％～30％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，海藻糖溶液的质量体积百分比为10％～20％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，海藻糖溶液的质量体积百分比为10％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，蔗糖溶液的质量体积百分比为10％～20％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，蔗糖溶液的质量体积百分比为10％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，甘油溶液的体积百分比为20％～30％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，甘油溶液的体积百分比为30％

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，脱脂乳溶液的体积百分比为20％。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，预定冷冻保藏条件为以-1～-10℃/min的降温速率从4℃降温至-80℃，并在-80℃下冷冻保藏，预定解冻条件为解冻温度采用0～40℃。

在本发明提供的植物乳杆菌的冷冻保藏方法中，还可以具有这样的特征：其中，降温速率为-10℃/min，解冻温度为0℃。

发明的作用与效果