[发明专利]microRNA‑1254及其种子基序和非种子序列在抑制肿瘤恶性增殖中的应用

说明书

本发明公开了microRNA‑1254、含其种子基序和/或非种子序列的小RNA序列及其药物组合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。经研究发现，microRNA‑1254可以抑制非小细胞肺癌细胞株NCI‑H1975和A549的细胞活力，并在肺癌A549裸鼠移植瘤模型中显著抑制裸鼠的肿瘤生长；在本发明中所发现的microRNA‑1254抗肿瘤具体作用机制是microRNA‑1254通过其种子基序与血红素氧化酶1mRNA的3’‑非翻译区结合、并通过其非种子序列与转录因子激活蛋白2αmRNA的3’‑UTR结合，从而抑制HO‑1和其转录因子TFAP2α的蛋白水平，最终达到抑制肿瘤生长的目的。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及microRNA-1254(miR-1254)、含其种子基序和/或非种子序列的小RNA序列及其药物组合物在制备用于抑制和/或治疗肿瘤的药物中的用途。

背景技术

血红素加氧酶1(heme oxygenase-1，HO-1)是血红素代谢的限速酶，它催化游离血红素释放出胆绿素、CO和Fe²⁺，胆绿素在胆绿素还原酶作用下生成胆红素[Proc NatlAcadSci USA 1968；61:748-755]。正常机体中，HO-1除了在肝脏和脾脏组织中高表达之外，在其他组织中表达量都比较低；但HO-1可以在多种肿瘤组织中被诱导高表达，如黑色素瘤[Jpn J Cancer Res 2000；91:906-910]、恶性胶质瘤[Brain Res 2000；882:1-8]、胰腺癌[Clin Cancer Res 2005；11:3790-3798]、前列腺癌[Urology 1996；47:727-733]和非小细胞肺癌[PLoS One 2012；7:e35065]等。越来越多的研究表明，HO-1能够调节细胞凋亡和周期，刺激血管生成，抑制或终止炎症反应，继而调控肿瘤的生长[Antioxid Redox Signal2007；9:2099-2117]，因此，HO-1是一个具有开发潜力的癌症治疗的新靶点。

microRNAs是一类长约22nt，在机体内发挥着调节基因转录和翻译的内源性非编码单链RNA分子。这类小RNA分子不仅可以通过与靶基因mRNA配对来诱导蛋白编码基因的转录后抑制，还可以以直接或间接的方式对基因的转录水平发挥激活或抑制作用，从而参与调控细胞的多种生理过程，包括增殖、分化、凋亡和代谢[Cell.2004；116(2):281-97]。HO-1作为一个在肿瘤发生发展中发挥了重要作用的基因，有很多miRNA可以调控其表达。JoanD.Beckman等人研究发现，在HEK293细胞中，miR-377与miR-217均能通过其种子区序列直接与HO-1的3’UTR结合，从而联合抑制HO-1蛋白的表达[Journal of Biological Chemistry2011；286:3194-3202]。本发明的发明人研究也发现，miR-1304能够通过其种子区序列靶向HO-1的3’UTR，继而通过下调HO-1的表达抑制非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的生长[ActaPharmacol Sin.2017；38:110-119]。另外，miRNA还可以通过抑制HO-1进而增强癌细胞对化疗药物的敏感性。例如，在肾细胞癌中，miR-220c能够通过抑制HO-1的表达缓解癌细胞对索拉替尼和伊马替尼的耐药作用[Neoplasma 2014；61:680-689]。