[发明专利]一种从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法

说明书

一种从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将牛樟芝发酵产物萃取液与有机溶剂按体积比5:1‑1:3的比例进行混合，并搅拌萃取得到混合液；步骤二，将混合液置于低温环境中，搅拌20‑60min，搅拌速率为50‑200rpm，得到冰晶；步骤三，在低温环境下，将冰晶压榨去除，得到剩余溶液；步骤四，将剩余溶液重复步骤二以及步骤三直至无冰晶生成为止，得到最终溶液；步骤五，将最终溶液进行低温真空浓缩，去除有机溶剂，所得膏状物即为活性成分。

技术领域

本发明涉及一种从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法，属于生化分离技术领域。

背景技术

长链高级烷烃(C12-C16)具有较高的log P值(6.6-8.8),因此对细胞的毒性作用较小，有较好的生物相容性，常用来做植物细胞、微生物细胞的两相培养溶剂。有许多学者研究利用长链高级烷烃为有机相，进行紫草毛状根两相培养生产紫草素、东北红豆杉两相培养生产紫杉醇、杜氏盐藻两相培养生产类胡萝卜素等，能够有效地将代谢产物从细胞中转移至有机相，并加快代谢产物的释放速率，同时对细胞生长抑制作用非常小。

长链高级烷烃(C12-C16)对许多脂溶性活性产物都有较好的萃取发酵效果，但是其沸点较高，例如正十二烷的沸点高达215℃，这导致不能利用水浴的真空浓缩去除发酵产物萃取液中的长链高级烷烃溶剂而得到活性产物，采用温度较高的油浴真空浓缩会使热敏性成分分解，而且存在安全隐患；利用乙醇等溶剂萃取长链高级烷烃也不能得到良好的效果，要消耗大量乙醇，萃取率较低，萃取后的十二烷烃中活性成分残余较多，而且乙醇中仍然会溶解部分十二烷烃。

发明内容

本发明是为了解决难以从含有长链高级烷烃的发酵产物萃取液中提取活性成分的问题而进行的，目的在于提供一种从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法。

本发明采用了以下技术方案：

本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，将牛樟芝发酵产物萃取液与有机溶剂按体积比5:1-1:3的比例进行混合，并搅拌萃取得到混合液。

步骤二，将混合液置于低温环境中，搅拌20-60min，搅拌速率为50-200rpm，得到冰晶。

步骤三，在低温环境下，将冰晶压榨去除，得到剩余溶液。

步骤四，将剩余溶液重复步骤二以及步骤三直至无冰晶生成为止，得到最终溶液。

步骤五，将最终溶液进行低温真空浓缩，去除有机溶剂，所得膏状物即为活性成分。

在本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法中，还可以具有这样的特征：其中，牛樟芝发酵产物包括牛樟芝谷物固态发酵产物以及牛樟芝原位萃取发酵产物。

在本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法中，还可以具有这样的特征：其中，萃取液中的萃取剂为碳原子个数为12-16的长链高级烷烃。

在本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法中，还可以具有这样的特征：其中，活性成分包括麦角甾醇、安卓奎诺尔、不饱和脂肪酸。

在本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法中，还可以具有这样的特征：其中，在步骤一中，有机溶剂为丙酮、乙醇或甲醇中的任意一种或任意两种及以上的混合溶剂。

在本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法中，还可以具有这样的特征：其中，在步骤一中，搅拌萃取的搅拌速率为300rpm，搅拌时间为30min。

在本发明提供的从牛樟芝发酵产物萃取液中提取活性成分的方法中，还可以具有这样的特征：其中，在步骤二中，低温的温度范围为-10-0℃。