[发明专利]一种鸭2型腺病毒病的卵黄抗体及制备方法

说明书

本发明提供一种防治鸭2型腺病毒病的卵黄抗体，其制备过程中使用的抗原为灭活后的GD株病毒制备的疫苗；所述的鸭2型腺病毒GD株，于2016年6月5日保藏在武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：V201633。本发明制备的鸭2型腺病毒病的卵黄抗体安全性良好，未出现由卵黄抗体引起的任何局部和全身不良反应。经过鉴定、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；利用攻毒后注射法和注射后攻毒法评估卵黄抗体的使用效果。结果显示，本发明中制备的鸭2型腺病毒病的卵黄抗体能够有效的预防和治疗鸭2型腺病毒病的感染，具有很好的商品化开发前景。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种防治鸭2型腺病毒病的卵黄抗体及其制备方法。

背景技术

腺病毒是家禽常见的传染性病原体。禽腺病毒分为三个群：Ⅰ群是从鸡、火鸡、鹅和鸭的呼吸道感染分离出来的禽腺病毒，有共同的群特异性抗原，可分为A、B、C、D、E5个种和12个血清型；鸭2型腺病毒属于Ⅰ群禽腺病毒，是1977年法国匈牙利人从患病番鸭上分离出来的，感染鸭主要表现精神沉郁，下痢，消瘦等症状。近年来，我国养鸭业发展迅速，尤其是散养户较多，一些养鸭设施简陋，消毒意识淡薄及环境卫生不到位等原因，疾病流行情况复杂造成一些新的变异株及不同血清型毒株出现。病毒一旦带入鸭群很难清除，给番鸭养殖业造成严重的经济损失。

目前，国内外仅有预防这种病的商品化的灭活疫苗，一方面，免疫后产生抗体时间长、保护率低、经济价值高；另一方面，鸭群发病时，不能及时、快速治疗。基于以上两点，研制安全有效的卵黄抗体迫在眉睫，必须通过创新技术克服这一问题。发明人筛选了一株变异的优良病毒株来制备疫苗免疫番鸭，采集高免鸭蛋制备卵黄抗体，可用于鸭2型腺病毒病的紧急预防和早期感染的治疗。

发明内容

本发明的目的是提供一种防治鸭2型腺病毒病的卵黄抗体及其制备方法。从而弥补现有技术的不足。

本发明所提供的鸭2型腺病毒病的卵黄抗体，其制备过程中使用的抗原为灭活后的GD株病毒制备的疫苗；所述的鸭2型腺病毒GD株，于2016年6月5日保藏在武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：V201633。

本发明所提供的卵黄抗体的制备方法，是将使用的抗原为灭活后的GD株病毒的疫苗免疫番鸭，经分离高免鸭蛋蛋黄、萃取、过滤、灭活精制而成。

其具体制备方法如下：

1)疫苗制备：

将GD株病毒液中加入终浓度0.2％的甲醛，37℃搅拌灭活16h，灭活的病毒液与油佐剂1:2混合乳化，得到鸭2型腺病毒病的灭活疫苗；

1)免疫：

第1次免疫：开产前2～3周，1.0ml/只；

第2次免疫：第1次免疫后2周，加强免疫1.0ml/只；

第3次免疫：第2次免疫后2周，加强免疫1.0ml/只；

第4次免疫：第3次免疫后2周，加强免疫1.0ml/只；

第N次免疫：第N-1次免疫后，每隔6～8周，加强免疫1.0ml/只；

3)采蛋第4次免疫后一周开始，每隔5天抽样高免鸭蛋，测定蛋黄中鸭2型腺病毒的琼扩抗体效价，蛋黄琼扩抗体效价≥1:32时收集高免蛋，2～8℃贮存备用，贮存时间不超过14日。

4)精制卵黄抗体制造对高免蛋进行蛋壳消毒、打蛋分离蛋黄、巴氏灭活Ⅰ、酸化萃取、离心分离、辛酸灭活Ⅱ、深滤、甲醛灭活Ⅲ、超滤除病毒、调配总混、过滤除菌得到抗体。

卵黄抗体在制备用于预防和治疗鸭2型腺病毒病的感染的制品中的应用。