[发明专利]一种杉木野外优异资源的繁育方法

权利要求书

1.一种杉木野外优异资源的繁育方法，包括以下步骤：

(1)以野外杉木植株半木质化侧枝作为外植体进行组织培养，得到一代组培苗；

所述组织培养包括不定芽的诱导，芽的增殖培养和芽的生根培养；

其中，所述不定芽的诱导所用培养基的配方为：MS+6-苄氨基腺嘌呤0.5～1.0mg/L+蔗糖25～35g/L+卡拉胶6.5～7.5g/L+聚乙烯吡咯烷酮8～15mg/L；

所述芽的增殖培养所用培养基的配方为：MS+6-苄氨基腺嘌呤0.05～0.2mg/L+萘乙酸0.005～0.02mg/L+蔗糖25～35g/L+卡拉胶6.5～7.5g/L；

所述芽的生根培养所用培养基的配方为：1/2MS+萘乙酸0.3～0.8mg/L+蔗糖20～30g/L+卡拉胶6.5～7.5g/L；

(2)将所述一代组培苗经炼苗后，移植于圃地中；

(3)当苗木长至一定高度时，压弯苗木主干，用土壤覆盖苗木主干基部至苗木中段，并将苗木基部的部分主干裸露在外，进行栽培；所述苗木高80～100cm时，压弯苗木主干，所述土壤覆盖厚度为3～5cm，所述裸露基部主干长度为10～15cm；

(4)选择所述裸露主干萌发出的半木质化萌条进行再次繁育；所述再次繁育为将所述半木质化萌条进行组织培养，得到丛生芽或组培苗。

2.根据权利要求1所述的繁育方法，其特征在于，步骤(1)中，所述外植体在进行组织培养前还包括灭菌的步骤，所述灭菌用75％酒精溶液和质量浓度为0.5％的次氯酸钠溶液进行灭菌。

3.根据权利要求1所述的繁育方法，其特征在于，所述组织培养的条件为：温度控制在25±2℃，相对湿度50％～60％，光照强度1500Lx～3000Lx，光照时间为每天12～16h。

4.根据权利要求1所述的繁育方法，其特征在于，步骤(2)中，所述炼苗在塑料大棚中进行，采用自然光照和湿度，温度控制在25～30℃；当组培苗根系长至1.0～1.5cm时，向组培苗中注入清水，使水面超过培养基表面0.5～1.0cm，开盖炼苗2～5天。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述组织培养包括不定芽的诱导，芽的增殖培养和芽的生根培养；

其中，所述芽的诱导所用培养基的配方为：MS+6-苄氨基腺嘌呤0.3～0.8mg/L+蔗糖25～35g/L+卡拉胶6.5～7.5g/L+聚乙烯吡咯烷酮8～15mg/L；

所述芽的增殖培养所用培养基的配方为DCR+6-苄氨基腺嘌呤0.8～1.5mg/L+苯基噻二唑基脲0.01～0.1mg/L+蔗糖25～35g/L+卡拉胶6.5～7.5g/L；

所述芽的生根培养所用培养基的配方为：1/2MS+萘乙酸0.3～0.8mg/L+蔗糖20～30g/L+卡拉胶6.5～7.5g/L。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述丛生芽长为1.5～2.0cm时，进行芽丛的分离和转瓶。