[发明专利]一种靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，从N端到C端，该嵌合抗原受体依次含有膜蛋白信号肽、抗间皮素近膜端的单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序；其中，所述长50个氨基酸残基以上的铰链区为IgG4 Fc CH2CH3铰链区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；其中，所述抗间皮素近膜端的单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3或4所示。

2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一个或多个特征：

所述信号肽选自CD8信号肽、CD28信号肽和CD4信号肽；

所述跨膜区选自CD28跨膜区、CD8跨膜区、CD3ζ跨膜区、CD134跨膜区、CD137跨膜区、ICOS跨膜区和DAP10跨膜区；

所述共刺激信号分子胞内结构域选自CD28、CD134/OX40、CD137/4-1BB、LCK、ICOS和DAP10胞内结构域；和

所述免疫受体酪氨酸活化基序为CD3ζ或FcεRIγ的酪氨酸活化基序。

3.如权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，

所述信号肽是CD8信号肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述跨膜区为CD8跨膜区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；

所述共刺激信号分子胞内结构域是CD28胞内结构域，其氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示，或所述共刺激信号分子胞内结构域是CD137胞内结构域，其氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；

所述免疫受体酪氨酸活化基序为CD3ζ酪氨酸活化基序，其氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示。

4.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体从N端到C端依次含有CD8信号肽、SEQ ID NO:3或4所示的单链抗体、IgG4 FcCH2CH3铰链区、CD8跨膜区、CD28胞内结构域和CD3ζ酪氨酸活化基序。

5.如权利要求4所述的嵌合抗原受体，其特征在于，

所述CD8信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；

所述CD28胞内结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；

所述CD3ζ酪氨酸活化基序的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示。

6.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示。

7.一种多核苷酸分子，其多核苷酸序列选自：

（1）编码权利要求1－6中任一项所述嵌合抗原受体的多核苷酸序列；和

（2）（1）所述多核苷酸序列的互补序列。

8.如权利要求7所述的多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸序列选自SEQ ID NO:14所示的多核苷酸序列或其互补序列。

9.一种核酸构建物，其含有权利要求7或8所述的多核苷酸分子。

10.如权利要求9所述的核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物是表达载体。

11.如权利要求10所述的核酸构建物，其特征在于，所述表达载体是真核表达载体。

12.如权利要求11所述的核酸构建物，其特征在于，所述真核表达载体含有选自piggybac、sleeping beauty、frog prince、Tn5和Ty的转座元件。

13.一种重组宿主细胞，所述重组宿主细胞含有权利要求9-12中任一项所述的核酸构建物，或表达权利要求1-6中任一项所述的嵌合抗原受体；其中，所述宿主细胞为T细胞。