[发明专利]一种从马尾藻提取多糖复合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于多糖提取技术领域，具体涉及一种从马尾藻提取多糖复合物的方法。

背景技术

马尾藻(Sargassum pallidum)是褐藻中的一类海藻，属褐藻门(Phaeophyta )，墨角藻目(Fucales)、马尾藻科((Sargassaceae)、马尾藻属((Sargassum)。马尾藻是暖温带性海藻，多年生的植物，因此全年都能见到。盛产于我国黄海、渤海沿岸各地，是一种习见的藻类，产量很大。国外分布于鄂霍次克海、千岛群岛、日本和朝鲜等地。马尾藻栖息环境要求海浪畅通，风大浪大，水色清晰，透明度高，阳光充足，通常生长于潮间带的石沼中和潮下带水下1- 4米深处的岩石上，为该水域的优势种类，资源十分丰富。

近20余年来，随着对褐藻的次级代谢产物—褐藻多酚化合物研究的深入，其独特的生物活性日益受到人们的关注。关于海藻中水、醇或脂溶性溶剂提取物的抗氧化活性报道甚多。MaStSUk认为海藻的水或醇提取物中抗氧化活性成分是来自马尾藻属的脂氧化酶抑制剂，或是来自Eisenia bicyclis的褐藻多酚。关于褐藻多酚的抗氧化机理，一般认为存在两种途径:一是通过酚轻基的离解。酚轻基的还原性是酚类化合物的共性之一，以间苯三酚为单体的褐藻多酚分子中的多个酚轻基可以作为氢的供体，易被空气中的氧所氧化;二是通过自由基途径。目前所公认的生物抗氧化剂主要是指可以清除自由基，抑制脂质过氧化的活性物质，Yan和Li自褐藻Sargassum kjellmanianum中纯化出褐藻多酚，并研究了其对鱼油酸败的抑制作用，发现其抗氧化效率比BHT高2.6倍。研究表明褐藻多酚具有很强的自由基清除能力，是一类在药学、食品和日化等领域很有使用前景的天然抗氧化剂和自由基清除剂。

现有技术，如中国发明授权专利文献，授权公告号CN 104829740 B，该发明涉及一种从草叶马尾藻中同步提取草叶马尾藻多糖和草叶马尾藻多酚的方法，所述的方法应用微波辅助提取、双水相萃取和膜分离技术从草叶马尾藻中同步提取获得草叶马尾藻多糖和草叶马尾藻多酚。该发明还提供了通过以上方法获得的草叶马尾藻多糖提取物和草叶马尾藻多酚提取物。其优点在于：马尾藻多糖提取率高，生物活性损失小，马尾藻多糖和马尾藻多酚的纯度都很高，同时该发明的方法具有时间短、处理量大、操作可连续化、成本低廉、环境清洁的优势，因此非常适合工业应用，但是该方法中的马尾藻多糖得率还具有提升空间。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从马尾藻提取的多糖复合物的方法，通过活性短肽显著提高马尾藻细胞壁破碎率，提高马尾藻多糖的得率和纯度，不会对马尾藻多糖造成营养损失的不良影响，提取的马尾藻多糖复合物可用于具有抗氧化、抗肿瘤效果的保健品中。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：一种从马尾藻提取多糖复合物的方法，包括细胞破壁，浓缩醇析，复溶除蛋白，冷冻干燥，具体操作步骤如下：

1）取马尾藻粉制成藻液，马尾藻粉与水的固液比为1:65-75，超声波破碎，功率为500w-800w，时间为10-20min，加入藻液重量0.01%-0.03%的活性短肽，活性短肽的氨基酸序列为QSGFCTSYYSKFCTLYGNLGICLHCSS，在98℃~100℃下水浴2-4h，6500-9000r/min离心5-10min，除藻体；

2）将藻液放入真空浓缩罐中真空浓缩至原体积的1/4-1/3，加入90%~95%的乙醇溶液，乙醇与浓缩液的体积比例为3-4：1，乙醇溶液在0.1T-0.3T磁场中静置2-4h；

3）复溶，在溶液中加入20%的三氯乙酸调pH值至3.5-4，静置过夜，7000-8000r/min离心10-18min，取上清液；

4）真空浓缩至原液体积的1/10-3/10，在-30℃至-25℃条件下冷冻干燥，得马尾藻多糖复合物。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

1）通过在马尾藻多糖提取之前进行细胞壁破碎处理，利用超声波、活性短肽和水浴使细胞壁破裂较为彻底，促进胞内物质溶出，不破坏其中有效成分，显著提升了马尾藻多糖的得率；

2）使用的活性短肽具有亲水性和亲脂性，亲水性使其溶于水中，亲脂性使其与马尾藻细胞膜结合，使细胞膜下形成小孔，致使细胞内的物质泄漏，有利于马尾藻多糖得率，利用活性肽结合水浴法进行细胞破碎，大大缩短了提取时间，提取效果好，还有效避免了破碎处理过程中需因升温及机械力引起的蛋白质变性；