[发明专利]一株新青霉菌及其代谢产物安他拟酸A有效
申请号: | 201710624795.7 | 申请日: | 2017-07-27 |
公开(公告)号: | CN107488594B | 公开(公告)日: | 2020-06-09 |
发明(设计)人: | 郑毅男;丁传波;张伟;刘文丛;赵婷 | 申请(专利权)人: | 郑毅男 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P13/02;C09K17/14;A61P3/10;A61P29/00;C12R1/80;C09K101/00 |
代理公司: | 吉林省长春市新时代专利商标代理有限公司 22204 | 代理人: | 唐盼 |
地址: | 130118 吉林省长春*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一株新 青霉 及其 代谢 产物 | ||
1.一株青霉菌Z08,其特征在于,其保藏号为:CGMCC NO.12761。
2.如权利要求1所述的一株青霉菌Z08,其特征在于,能够分离得到一个化合物安他拟酸A;化学结构为:
3.根据权利要求2所述的一株青霉菌Z08,其特征在于,所述安他拟酸A,其化学名称为:2-{2-[(2E)-3-[(2-氨基苯基)甲酰胺基]丙-2-烯酰胺基]乙基}丙二酸;分子式为:C15H17N3O6,分子量为:335.1117;该化合物为淡黄色无定形粉末,易溶于水,二甲基亚砜。
4.一种生产安他拟酸A的方法,其特征在于:发酵培养权利要求1所述的青霉菌Z08,获得含有该安他拟酸A的青霉菌Z08发酵物,从该发酵物中分离安他拟酸A。
5.根据权利要求4所述的一种生产安他拟酸A的方法,其特征在于:具体生产方法包括以下步骤:
①发酵物的制备
取青霉菌Z08的孢子划线列于8升PDA的琼脂平板上:取酵母提取物0.5克,葡萄糖10.0克,磷酸钙5.0克,硫酸铵0.5克,氯化钾0.2克,硫酸镁0.1克,硫酸锰0.0001克,硫酸亚铁0.0001克,琼脂15.0克,板在室温下,温育14天;当观察到琼脂板变成黄颜色,同时孢子变成绿色时,用水将孢子从琼脂板上除去,然后将琼脂再用水提取;所得琼脂浆液加10升水中搅拌5小时,并通过金属过滤,得到青霉菌Z08发酵产物;
②反相液相色谱分离纯化
将上述发酵产物溶液减压蒸发至2L的体积,然后用乙酸乙酯等量萃取3次,萃取液减压蒸干,干燥萃取物溶于水,依次用环己烷与甲醇萃取,取甲醇部分进行HPLC制备;
色谱条件:A和B溶剂梯度,0-5分钟,5%A;5-15.5分钟,线性梯度至60%A;15.5-16分钟,线性梯度至100%A;16-17.5分钟,100%A等度;17.5-18分钟,线性到5%A,18-21分钟,5%A;所述A为乙腈含0.1%甲酸,B为含0.1%甲酸的水。
6.权利要求1所述的青霉菌Z08在促进土壤中磷溶解中的应用。
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