[发明专利]一种载药的叶酸修饰蒙脱石纳米制剂及其制备方法

说明书

本发明公开一种载药的叶酸修饰蒙脱石纳米制剂及其制备方法，包括叶酸活性酯的制备，氨基修饰的蒙脱石的制备以及叶酸修饰蒙脱石纳米制剂的制备。本发明所制备的蒙脱石纳米制剂制备工艺简单，生产成本低，易于工业化生产。一方面，该新型纳米制剂具有一定的缓释作用，可提高药物的生物利用度，另一方面，制剂表面修饰叶酸分子可以实现对肿瘤细胞的主动靶向，降低药物的毒副作用，增强疗效，具有潜在的临床应用价值。

技术领域

本发明属于医疗药物领域，具体涉及到一种载药的叶酸修饰蒙脱石纳米制剂及其制备方法。

背景技术

靶向给药系统是药剂学研究领域中的热点之一。靶向给药能够选择性的将药物输送至靶标位置，增加疗效的同时减少药物对正常组织的毒副作用。研究表明，某些肿瘤细胞表面高度表达叶酸受体，叶酸与该位点结合呈可饱和性，高度特异性，而正常组织细胞表面相对低表达叶酸受体，与大分子抗体相比，叶酸属于小分子物质，具有易修饰、低免疫原性、化学及物理稳定性好，成本低等诸多优点，使其成为较理想的肿瘤靶向载体。近年来，纳米给药系统是靶向给药系统的研究重点之一。其中无机纳米材料由于具有化学及物理稳定性好、成本低、载药量高、生物相容性良好和表面易于修饰等优点，受到广泛的关注，被多方研究。蒙脱石是一种2：1型的层状硅铝酸盐，作为药用矿物已被多国药典收载，其特殊的带负电荷的层状结构使其具有较强的离子交换能力，高比表面积和强吸/脱附力的特性令其极有可能是一种性能优良的缓/控释制剂载体。在本发明中，通过本发明所阐述的方法步骤所制备的载药的叶酸修饰蒙脱石通过肿瘤部位的EPR效应进入肿瘤间质，从而叶酸与肿瘤细胞表面的叶酸受体特异性结合，然后通过叶酸受体介导进入到肿瘤细胞内，实现肿瘤主动靶向给药。

本发明所制备的载药的叶酸修饰蒙脱石纳米制剂可以实现主动肿瘤靶向作用，降低药物的毒副作用，增强药物的治疗作用。

发明内容

本发明的目的在于针对，提供一种新的载药的叶酸修饰蒙脱石纳米制剂及其制备方法。该新型载药的叶酸修饰蒙脱石纳米制剂在实现负载药物缓释作用的同时，还可通过修饰的叶酸的肿瘤靶向性实现主动靶向作用，由此降低药物的毒副作用，增强药物的治疗作用。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现，但本发明并不仅限于下述技术：

步骤1：称取处方量的叶酸，三乙胺，N-羟基琥珀酰亚胺和二环己基碳二亚胺溶于有机溶剂，室温避光搅拌24h，得到活化的叶酸活性酯。

步骤2：称取处方量的蒙脱石K-10，于70℃加硫酸(1gMMT：10mL H₂SO₄)搅拌0.5h，离心后用水洗涤多次即得空白蒙脱石纳米粒。

步骤3：使用硅烷偶联剂修饰步骤2制得的空白蒙脱石纳米粒，得到氨基修饰的蒙脱土纳米粒。

步骤4：称取步骤1制得的叶酸活性酯和步骤3制得的氨基修饰的蒙脱石纳米粒，分散于无水二甲基亚砜中，搅拌反应24h，得到叶酸修饰的蒙脱石纳米粒。

步骤5：称取步骤4制得的叶酸修饰的蒙脱石纳米粒，分散于甲醇中，得到叶酸修饰的蒙脱石纳米混悬液，制备药物乙醇溶液，加入到上述制剂纳米混悬液中，搅拌吸附后旋转蒸发除去有机溶剂，得到载药的叶酸修饰蒙脱石纳米粒。

步骤6：建立人肝癌HepG-2细胞模型，采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法研究载药的叶酸修饰蒙脱石纳米粒的细胞毒性。

本发明方法中，步骤1合成叶酸活性酯的试剂包括但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、二环己基碳二亚胺(DCC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、N,N-二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-羟基苯并三唑(HOBT)。所用有机溶剂包括但不限于二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)、二甲基亚砜(DMSO)、二氯甲烷(DCM)、三氯甲烷(TCM)等。

附图说明