[发明专利]用于正毛化橘红种苗鉴定的引物、试剂盒及鉴定方法有效

专利信息
申请号: 201710630706.X 申请日: 2017-07-28
公开(公告)号: CN107190099B 公开(公告)日: 2020-12-04
发明(设计)人: 胡珊;王永辉;曾仑;连林生;周劲松;邬龙怡 申请(专利权)人: 广州市香雪制药股份有限公司;广州白云医用胶有限公司;广州市香雪亚洲饮料有限公司
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 郑彤
地址: 510530 广东省广州市萝*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 用于 正毛化 橘红 种苗 鉴定 引物 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.用于正毛化橘红种苗鉴定的PCR引物,其特征在于,包括第一引物、第二引物;其中:所述第一引物的碱基序列如SEQ ID No.1所示,所述第二引物的碱基序列如SEQ ID No.2所示。

2.用于正毛化橘红种苗鉴定的PCR试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的第一引物、第二引物。

3.根据权利要求2所述的PCR试剂盒,其特征在于,所述第一引物、所述第二引物的使用浓度为0.2-0.5μM。

4.根据权利要求2或3所述的PCR试剂盒,其特征在于,还包括DNA聚合酶、镁离子、dNTPs。

5.根据权利要求4所述的PCR试剂盒,其特征在于,所述DNA聚合酶的使用浓度为1.0-2.0U/25μL。

6.根据权利要求4所述的PCR试剂盒,其特征在于,所述镁离子的使用浓度为1.5-2.5mM。

7.根据权利要求4所述的PCR试剂盒,其特征在于,所述dNTPs的使用浓度为180-270μM。

8.一种正毛化橘红种苗鉴定方法,其特征在于,包括:

(1)得到待测种苗的基因组DNA为模板的步骤;

(2)加入权利要求1所述的第一引物进行PCR反应,并分离所得PCR反应产物得到第一结果的步骤;

(3)加入权利要求1所述的第二引物进行PCR反应,并分离所得PCR反应产物得到第二结果的步骤;

(4)分析所述第一结果、所述第二结果得出鉴定结果的步骤。

9.根据权利要求8所述的正毛化橘红种苗鉴定方法,其特征在于,所述分析所述第一结果、所述第二结果得出鉴定结果的步骤包括:

对比所述第一结果、所述第二结果,如果第一结果不存在300-500bp的条带而第二结果存在300-500bp的条带,则待测种苗种即为正毛化橘红种苗,否则待测种苗种为非正毛化橘红种苗。

10.根据权利要求8或9所述的鉴定方法,其特征在于,所述PCR反应时所用模板的浓度为30-80ng/25μL;所述PCR反应的程序为:95℃、5min;95℃、45s,51-58℃、45s,72℃、90s,35个循环;72℃、10min。

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