[发明专利]基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法在审
| 申请号： | 201710631067.9 | 申请日： | 2017-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN109307669A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 颜娟;周洋洋;杜玉梅;钟建;栾东磊 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | G01N21/65 | 分类号： | G01N21/65 |
| 代理公司： | 上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙) 31293 | 代理人： | 吴瑾瑜 |
| 地址： | 201306 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纳米材料表面 末端转移酶 核壳结构 纳米材料 单链DNA 核壳 扩增核酸 可用 组装 生物分析检测 生物检测领域 增强拉曼信号 功能化应用 化学还原法 脱氧核苷酸 金属壳层 起始引物 制备核壳 长链DNA 灵敏度 靶分子 复合物 小分子 碱基 均一 抗体 吸附 制备 复合 输出 检测 覆盖 | ||
1.基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，步骤包括：
(1)表面组装起始引物链的纳米材料与末端转移酶和脱氧核苷酸混合，用末端转移酶表面进行DNA扩增反应，将脱氧核苷酸转移到纳米材料表面组装的起始引物链上，在纳米材料表面形成长单链DNA，获得纳米材料-长单链DNA复合物；
(2)用化学还原法在纳米材料-长单链DNA复合物外覆盖金属壳层，形成核壳结构。
2.根据权利要求1所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的起始引物链是一段同种碱基组成的核酸序列，碱基长度3～30；所述的脱氧核苷酸与起始引物链的碱基相同。
3.根据权利要求1所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，步骤(1)的扩增反应条件为：由末端转移酶介导，20～37℃下扩增1～16小时。
4.根据权利要求1～3任一项所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，所述的纳米材料为金属纳米颗粒或金属纳米棒；金属纳米颗粒的粒径为1～60nm；金属纳米棒的直径为1～60nm，长度15～100nm。
5.根据权利要求1所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，所述的长单链DNA长度为100～300碱基。
6.根据权利要求1所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，步骤(1)中，表面组装起始引物链的纳米材料制备方法包括如下步骤：
a.巯基修饰的起始引物链与纳米材料溶液混合；震荡反应8～16小时后加入磷酸缓冲液，反应8～16小时；纳米材料与起始引物链的摩尔比为1：600～2000；
b.老化后离心洗涤。
7.根据权利要求1所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳SERS结构的方法，其特征在于，步骤(2)所述的化学还原法为：加入金属壳层前体溶液和还原剂，反应3～20小时。
8.根据权利要求7所述基于末端转移酶扩增核酸链制备核壳结构的方法，其特征在于，所述的金属壳层前体为氯金酸或硝酸银。
9.一种核壳SERS结构，其特征在于，通过权利要求1～8任一项所述的方法制备。
10.权利要求9所述的核壳SERS结构在制备SERS探针方面的应用。
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