[发明专利]一种蛋白质层层组装功能材料的制备方法

权利要求书

1.一种蛋白质层层组装功能材料的制备方法，包括以下步骤：

1)设计蛋白质层层组装构筑单元，所述构筑单元为包含正交的蛋白质反应对以及功能蛋白结构域的融合蛋白，其中同一蛋白质反应对的两个蛋白质分别位于不同的构筑单元内；

2)构建蛋白质层层组装构筑单元所对应的基因并引入表达载体中，然后在细胞中表达所构建基因对应的蛋白；

3)对表达的蛋白质进行纯化，得到高纯度蛋白质层层组装构筑单元；

4)利用正交的蛋白质反应对对蛋白质进行层层组装，得到所需功能材料。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述正交的蛋白质反应对为谍捕手和谍标签反应对，以及探捕手和探标签反应对，或者是其它彼此正交的蛋白质反应对。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述谍标签和谍捕手的氨基酸序列分别如序列表中SEQ ID No：1和SEQ ID No：2所示，探标签和探捕手的氨基酸序列分别如序列表中SEQ ID No：5和SEQ ID No：6所示。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述谍标签和谍捕手对应的基因序列分别如序列表中SEQ ID No：3和SEQ ID No：4所示，所述探标签和探捕手对应的基因序列分别如序列表中SEQ ID No：7和SEQ ID No：8所示。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述构筑单元中包括一个或者多个相同或不同的功能蛋白结构域，所述功能蛋白结构域位于正交蛋白质反应对之间。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述功能蛋白结构域选自弹性蛋白类似物、纳米抗体、亲和体、超级铀结合蛋白和二氢叶酸还原酶中的一种或多种。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白质层层组装构筑单元是包含探标签-谍捕手-探标签的构筑单元和包含探捕手-谍标签-探捕手的构筑单元，在探标签和谍捕手之间，以及探捕手和谍标签之间插入功能蛋白结构域。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白质层层组装构筑单元在N端具有6×His标签。

9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)对蛋白质进行层层组装的界面上具有与蛋白质连接的桥梁。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，层层组装的界面为金表面，通过含有多个半胱氨酸残基的构筑单元前驱体蛋白进行第一层组装；或者，层层组装的界面为硅基材料表面，利用氨基硅烷偶联剂预先对硅材料表面进行氨基改性，改性后再利用3-马来酰亚胺丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯使其表面富含马来酰亚胺基团，然后通过含有多个半胱氨酸残基的构筑单元前驱体蛋白进行第一层组装。