[发明专利]一种利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法有效
申请号: | 201710638941.1 | 申请日: | 2017-07-31 |
公开(公告)号: | CN107217080B | 公开(公告)日: | 2020-03-31 |
发明(设计)人: | 杨云;黄振华;赵国萍;王小红;王渭清;刘皛 | 申请(专利权)人: | 深圳市华利康纤生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/00;C12N11/14;C12N11/10 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 胡建华 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区粤海街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 固定 制备 菊芋 果糖 方法 | ||
1.一种利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1) 将由菊芋制备得到的菊粉粗提液进行脱色、脱苦、脱盐处理,得到菊粉精制液;
(2) 将步骤(1)得到的菊粉精制液加入固定化菊粉内切酶树脂柱,从固定化菊粉内切酶树脂柱的流出液再加入模拟移动床色谱分离装置进行分离纯化,以水为洗脱剂,所述模拟移动床包括I ~ IV个区,每一个区包括1~6根色谱柱,其中Ⅰ区、Ⅱ区色谱柱填充弱酸型阳离子交换树脂,Ⅲ区、Ⅳ区色谱柱填充阳离子分子筛;
所述固定化菊粉内切酶树脂柱内填充壳聚糖/二氧化硅固定化菊粉内切酶;
(3) 将得到的低聚果糖溶液减压蒸发浓缩,既得到低聚果糖;
步骤(2)中,模拟移动床色谱分离装置的工艺参数如下:
运行温度为35℃~50℃,压力为0.1~0.4Mpa,进料液流量20~100mL/min,洗脱剂的流量为50~130mL/min,设定I区流速为30cm/h~50cm/h,II 区流速为20cm/h~50cm/h,III 区流速为30cm/h~50cm/h,IV区流速为20cm/h~30cm/h;
所述的弱酸型阳离子交换树脂为D-85;
所述阳离子分子筛的类型为Y型分子筛;
壳聚糖/二氧化硅固定化菊粉内切酶的制备方法如下:
(1a) 取介孔二氧化硅1~10g、壳聚糖5~20g于100~150mL乙醇中,在50~100℃下反应10~24h,过滤,用乙醇洗涤,干燥,得到壳聚糖修饰的二氧化硅载体;
(2a) 将步骤(1a)得到的壳聚糖修饰的二氧化硅载体加入体积分数为1%~4%的戊二醛水溶液中,反应2~10h,过滤,用水洗涤滤出物,再将滤出物加入内切菊粉酶的浓度为1~5mg/L的磷酸水溶液中,在30~40℃条件下反应1~10h,抽滤,得到壳聚糖/二氧化硅固定化菊粉内切酶。
2.根据权利要求1所述利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法,其特征在于,步骤(1)中,菊粉粗提液脱色、脱苦、脱盐的方法如下:将菊粉粗提液依次通过活性炭、壳聚糖、阳离子大孔树脂、纳滤膜。
3.根据权利要求2所述利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法,其特征在于,所述的阳离子大孔树脂为H103。
4.根据权利要求2所述利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法,其特征在于,所述的纳滤膜为DL8040F。
5.根据权利要求1所述利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法,其特征在于,模拟移动床色谱分离装置的工艺参数如下:
运行温度为45℃,压力为0.2Mpa,进料液流量50mL/min,洗脱剂的流量为70mL/min,设定I区流速为45cm/h,II 区流速为35cm/h,III 区流速为45cm/h,IV区流速为25cm/h。
6.根据权利要求1所述利用固定化酶制备菊芋低聚果糖的方法,其特征在于,所述减压蒸发浓缩,其压力为-0.098Mpa。
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