[发明专利]一种检测铁皮石斛的核酸组合、试剂盒以及方法

说明书

本发明公开了一种检测铁皮石斛的核酸组合、试剂盒以及方法，涉及分子生物学技术领域。本发明公开的检测铁皮石斛的核酸组合SEQ ID NO.1‑2所示的内引物组和SEQ ID NO.3‑4所示的外引物组。该核酸组合通过LAMP技术可快速、特异、灵敏、简便的检测出铁皮石斛。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，具体而言，涉及一种检测铁皮石斛的核酸组合、试剂盒以及方法。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)属兰科石斛属，俗称铁皮兰、黑节草，是我国传统名贵中药。现代药理研究表明，铁皮石斛具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、扩张血管及抗血小板凝集等作用，因此在临床中被广泛应用。铁皮石斛是中国药典记录加工枫斗的唯一来源，是石斛类药材中一个较为著名的商品，常被视为价格昂贵的极品。在《中华人民共和国药典》2015年版中更是被单独分列出来。但目前市场上流通的商品铁皮石斛中混杂较多，民间用于枫斗加工的材料也是五花八门。市场上有30余种石斛属及部分石仙桃属、金石斛属和石豆兰属植物在市场上冒充铁皮石斛和其它药用石斛。对于石斛干品而言，加工后的干品外形非常相似，依靠经典的鉴定方法则更难鉴别。此外，来源不同的铁皮石斛在化学成分上也有较大差异，严重影响了商品铁皮石斛质量的稳定性。

近年来发展的以分子生物学为基础的检测方法如DNA条形码、位点特异性PCR等尽管克服了传统鉴别方法准确度不高、主观性大等缺点，在实验室条件下实现了铁皮石斛的准确检测，但是由于常规PCR需要昂贵的PCR仪或测序仪以及凝胶电泳以及成像系统等，大大限制了这些检测方法的推广应用。因此，建立适用于铁皮石斛的准确、快速、低成本的检测方法一直是中药鉴定领域中亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测铁皮石斛的核酸组合，该核酸组合可快速、特异、灵敏、简便的鉴别铁皮石斛真伪。

本发明的另一目的在于提供上述核酸组合的应用。

本发明的另一目的在于提供一种检测铁皮石斛的试剂盒。

本发明的另一目的在于提供一种检测铁皮石斛的方法，该方法可实现在药市、药房、产地等快速、特异、灵敏、简便的鉴别出铁皮石斛真伪的目的。

本发明是这样实现的：

一种检测铁皮石斛的核酸组合，其包括SEQ ID NO.1-2所示的内引物组和SEQ IDNO.3-4所示的外引物组。

上述的核酸组合在检测铁皮石斛中的应用。

上述的核酸组合在制备用于检测铁皮石斛的试剂盒中的应用。

一种检测铁皮石斛的试剂盒，其包括上述的核酸组合。

一种检测铁皮石斛的方法，其包括：采用上述的核酸组合对待测样品进行LAMP反应。

本发明具有以下有益效果：

本发明的提供的核酸组合，其包括SEQ ID NO.1-2所示的内引物组和SEQ IDNO.3-4所示的外引物组。该核酸组合通过LAMP技术可快速、特异、灵敏、简便的检测出铁皮石斛；相应地，本发明提供的检测铁皮石斛的方法，具有以下优点：

(1)检测时间短，仅40分钟即可获得检测结果，比现有的分子生物学检测方法缩短2-3小时。

(2)对仪器设备要求低，不需要普通PCR所用的PCR仪、电泳槽及凝胶成像系统，只要一个水浴锅即可完成检测反应，可实现现场检测。

(3)操作简单，整个过程不涉及复杂的仪器设备，检测结果清晰，只用肉眼在日光下观察观察颜色即可判断。

附图说明