[发明专利]一种血管支架的快速内皮化设备及其方法有效
申请号: | 201710655499.3 | 申请日: | 2017-08-03 |
公开(公告)号: | CN109385370B | 公开(公告)日: | 2021-07-02 |
发明(设计)人: | 张宇晨;董飞宏;国晋菘;张珏;方竞 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京安贞医院;北京大学 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M3/00;C12N5/071;C12N13/00 |
代理公司: | 北京万象新悦知识产权代理有限公司 11360 | 代理人: | 王岩 |
地址: | 100029*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血管 支架 快速 内皮 设备 及其 方法 | ||
1.一种血管支架的快速内皮化设备,其特征在于,所述快速内皮化设备包括:培养皿、固定架、固定梁、金属棒、金属圆筒和脉冲电场发生装置;其中,在管状的血管支架的表面滴敷有内皮细胞悬液;在血管支架内设置金属棒;在血管支架外设置金属圆筒;所述金属棒、血管支架和金属圆筒的中轴线共轴,三者通过固定架固定;所述血管支架的内径大于金属棒的半径;血管支架的外径小于金属圆筒的内径,从而在血管支架与金属棒之间以及血管支架与金属圆筒之间有空隙;所述培养皿中盛有培养基;血管支架浸没在培养基中,并通过固定梁水平固定;所述金属棒和金属圆筒分别电学连接至脉冲电场发生装置的正极和负极,脉冲电场发生装置产生脉冲电场,在金属棒与金属圆筒之间形成均匀的电场,使得血管支架的各点电场相同;脉冲电场对细胞产生不同的生物学效应,通过控制脉冲电场的脉冲宽度、电场强度、脉冲频率以及脉冲激发个数,采用物理电刺激内皮细胞悬液,能够使内皮细胞的胞内游离的钙离子浓度和活性氧自由基含量显著提高,同时提高内皮细胞培养基中一氧化氮的含量,钙离子浓度的升高能够激活休眠细胞进入细胞周期进行分裂,活性氧自由基和一氧化氮作为信号分子调控内皮细胞的生理过程,以调控内皮细胞的增殖过程,从而加速血管支架内皮化;脉冲电场的脉冲宽度为10~300ns,脉冲电场的电场强度为5~20kV/cm,脉冲电场的脉冲频率为0.1Hz~4Hz,脉冲激发个数为10~50个。
2.如权利要求1所述的快速内皮化设备,其特征在于,所述内皮细胞悬液的浓度为1×107~5×107个/ml。
3.如权利要求1所述的快速内皮化设备,其特征在于,所述脉冲电场为非热效应的脉冲电场序列。
4.如权利要求1所述的快速内皮化设备,其特征在于,所述固定架为可调节的固定架,根据血管支架的内径调整固定架的内径。
5.一种如权利要求1所述的血管支架的快速内皮化方法,其特征在于,所述快速内皮化方法包括以下步骤:
1)将内皮细胞悬液滴在管状的血管支架的表面;
2)将金属棒设置在血管支架内,将金属圆筒设置在血管支架外,金属棒、血管支架和金属圆筒的中轴线共轴,通过固定架将三者固定;
3)培养皿中盛放培养基,将血管支架浸没在培养基中,并通过固定梁将血管支架水平固定;
4)金属棒和金属圆筒分别电学连接至脉冲电场发生装置的正极和负极;
5)脉冲电场发生装置产生脉冲电场,在金属棒与金属圆筒之间形成均匀的电场,使得血管支架的各点电场相同,控制脉冲电场的脉冲宽度、电场强度、脉冲频率以及脉冲激发个数,通过物理电刺激调控内皮细胞的增殖过程,从而加速血管支架的内皮化,脉冲电场的脉冲宽度为10~300ns;脉冲电场的电场强度为5~20kV/cm;脉冲电场的脉冲频率为0.1Hz~4Hz;脉冲激发个数为10~50个;
6)将浸泡有物理电刺激后携带内皮细胞的血管支架的培养皿置于CO2培养箱中培养。
6.如权利要求5所述的快速内皮化方法,其特征在于,在步骤1)中,内皮细胞悬液的浓度为1×107~5×107个/ml。
7.如权利要求5所述的快速内皮化方法,其特征在于,在步骤6)中,培养的时间为24~48h。
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