[发明专利]一种梅片树组织培养的培养基及培养方法有效
申请号: | 201710657718.1 | 申请日: | 2017-08-03 |
公开(公告)号: | CN107278902B | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
发明(设计)人: | 马笑宇;傅明辉 | 申请(专利权)人: | 广东工业大学 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;A01H4/00 |
代理公司: | 11227 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 510062 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 梅片 植物组织培养技术 组织培养 产业化生产 初代培养基 继代培养基 生根培养基 有效的途径 繁殖周期 快速繁殖 培养基 生根率 外植体 新途径 芽诱导 树枝 | ||
1.一种梅片树组织培养的培养基,其特征在于,包括初代培养基、继代培养基和生根培养基;
所述初代培养基为:DCR培养基+2~3mg/L 6-BA+0.05~0.1mg/L NAA+10g/L琼脂+30g/L蔗糖,pH值为5.8~5.9;
所述继代培养基为:DCR培养基+3~5mg/L 6-BA+0.05~0.1mg/L NAA+10g/L琼脂+30g/L蔗糖,pH值为5.8~5.9;
所述生根培养基为:DCR培养基+0~1mg/L 6-BA +1.5mg/L IBA+10g/L琼脂+10g/L蔗糖,pH值为5.8~5.9;
所述初代培养基上接种的外植体为:选择4~5月份采集梅片树的带芽一年生的健康枝条,去掉叶片保留叶柄;
所述继代培养基上接种经所述初代培养基诱导获得的腋芽;
所述生根培养基上接种经所述继代培养基培养获得的丛生芽。
2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述初代培养基为: DCR培养基+2mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+10g/L琼脂和30g/L蔗糖,pH值为5.8;
所述继代培养基为:DCR培养基+4mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+10g/L琼脂+30g/L蔗糖,pH值为5.8;
所述生根培养基为:DCR培养基+ 1.5mg/L IBA+10g/L琼脂+10g/L蔗糖,pH值为5.8。
3.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述初代培养基为:DCR培养基+2mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+10g/L琼脂+30g/L蔗糖,pH值为5.9;
所述继代培养基为:DCR培养基+3mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+10g/L琼脂+30g/L蔗糖,pH值为5.9;
所述生根培养基为:DCR培养基+1.5mg/L IBA+1mg/L 6-BA+10g/L琼脂+10g/L蔗糖,pH值为5.9。
4.一种梅片树的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将梅片树外植体接种到权利要求1~3任一项所述培养基中的初代培养基中进行初代芽诱导培养,诱导外植体长出腋芽;
步骤2:将腋芽转接到权利要求1~3任一项所述培养基中的继代培养基进行芽增殖培养,得到丛生芽;
步骤3:将丛生芽转接到权利要求1~3任一项所述培养基中的生根培养基进行生根培养,得到组培苗。
5.根据权利要求 4所述的组织培养方法,其特征在于,步骤1中所述梅片树外植体接种前还包括:选择4~5月份采集梅片树的带芽一年生的健康枝条,去掉叶片保留叶柄,然后切成有一对芽或一个顶芽的长1~3cm小段,进行消毒处理。
6.根据权利要求5所述的组织培养方法,其特征在于,所述消毒处理具体为:将去掉叶片的梅片树枝条依次进行酒精消毒、水清洗、氯化汞溶液消毒和水清洗。
7.根据权利要求6所述的组织培养方法,其特征在于,所述酒精的体积百分数为75%,酒精消毒的时间为1~2min;所述氯化汞溶液的质量百分浓度为0.1%,消毒时间为8-12min。
8.根据权利要求4至7任一项所述的组织培养方法,其特征在于,所述梅片树组织培养的光照周期为16h/d,光照强度为3500lx,培养温度为24~26℃,相对湿度为30~40%。
9.根据权利要求4所述的组织培养方法,其特征在于,所述得到组培苗后还包括炼苗的步骤。
10.根据权利要求9所述的组织培养方法,其特征在于,所述炼苗为:闭瓶室外弱光放置5天,适当遮阴;强光下放置5天,然后将组培苗打开瓶盖通风5-7天,期间用薄膜覆盖保湿,适当喷水;移栽后淋足定根水,薄膜覆盖保湿,根据湿度适当补水,逐渐减少喷水量并逐渐去掉覆膜,30-40d后转入正常养护。
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