[发明专利]一种促进绿萝愈伤组织快速生长的方法在审
申请号: | 201710658434.4 | 申请日: | 2017-08-03 |
公开(公告)号: | CN107372112A | 公开(公告)日: | 2017-11-24 |
发明(设计)人: | 王健;刘坤;申亮;卢迪浩;郑德助;施金玉;包宇飞 | 申请(专利权)人: | 东方上彩现代农业有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人: | 王玉桂 |
地址: | 572634 海南省东方市板桥*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 促进 绿萝愈伤 组织 快速 生长 方法 | ||
1.一种促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,包括以下步骤:
选取母株,经预处理后取绿萝茎段外植体;
将所述绿萝茎段外植体进行聚乙烯吡硌烷酮浸泡后,并接种至愈伤组织诱导培养基中,得第二愈伤组织;
将所述第二愈伤组织转接至继代培养基1号和继代培养基2号中培养,即得;
所述继代培养基1号包括如下组分:
改良MS培养基1号、6-苄氨基腺嘌呤、ZT、吲哚-3-乙酸、VC、蔗糖和琼脂粉;
所述继代培养基2号包括如下组分:
改良MS培养基3号、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、AC、蔗糖和琼脂粉。
2.如权利要求1所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,所述选取母株,经预处理后取绿萝茎段外植体,包括:
选取母株运用多菌灵灌根;
取所述母株生长点处茎段;
将所述茎段消毒,得绿萝茎段外植体。
3.如权利要求2所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,所述选取母株运用多菌灵灌根,包括:
选取母株使用80%多菌灵1000倍溶液进行灌根30天,每10天1次。
4.如权利要求3所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,
所述愈伤组织诱导培养基包括愈伤组织诱导培养基1号和愈伤组织诱导培养基2号;
所述将所述绿萝茎段外植体进行聚乙烯吡硌烷酮浸泡后,并接种至愈伤组织诱导培养基中,得第二愈伤组织,包括:
将所述绿萝茎段外植体修剪后,得茎段段样;
将所述茎段段样用2g/L的聚乙烯吡硌烷酮浸泡10-15分钟;
将药物浸泡的所述茎段段样接种至愈伤组织诱导培养基1号中,在温度25℃-28℃和湿度50%-65%的条件下进行暗培养10天后,给予1500-20001X的光照继续培养,得初期绿萝愈伤组织;
将所述初期绿萝愈伤组织转接入诱导培养基2号中,在温度25℃-28℃和湿度50%-65%的条件下进行培养7天后,给予光照2001X继续加速培养,得第二愈伤组织。
5.如权利要求4所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,所述愈伤组织诱导培养基1号包括如下组分:
改良MS培养基1号、TDZ、萘乙酸、D丁酯、蔗糖、椰子水和琼脂粉;
所述愈伤组织诱导培养基2号包括如下组分:
改良MS培养基2号、6-苄氨基腺嘌呤、KT、萘乙酸、IBA、水解酪蛋白、琼脂粉和蔗糖。
6.如权利要求5所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,所述愈伤组织诱导培养基1号按如下方法配置:
在改良MS培养基1号中,按照浓度加入0.5mg/L的TDZ、0.2mg/L的萘乙酸、0.5mg/L的D丁酯、30mg/L的蔗糖、100mL/L的椰子水和7g/L的琼脂粉,调节PH值至5.6-5.8,即得;
所述愈伤组织诱导培养基2号按如下方法配置:
在改良MS培养基2号中,按照浓度加入2.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.1mg/L的KT、0.2mg/L的萘乙酸、0.1mg/L的IBA、200-500g/L的水解酪蛋白、7g/L的琼脂粉和30g/L的蔗糖,调节PH值至5.6-5.8,即得。
7.如权利要求1所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,所述将所述第二愈伤组织转接至继代培养基1号和继代培养基2号中培养,即得,包括:
将所述第二愈伤组织转接至亟待培养基1号中在光照强度1500-20001x、光照时间12小时/日、温度25℃-28℃条件下进行培养40天,获得第二代愈伤组织;
将所述第二代愈伤组织使用继代培养基2号进行继代培养,即得。
8.如权利要求7所述促进绿萝愈伤组织快速生长的方法,其特征在于,所述继代培养基1号,按如下方法进行配制:
在改良MS培养基1号中,按照浓度加入2.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、1.0mg/L的ZT、0.3mg/L的吲哚-3-乙酸、50mg/L的VC、25g/L的蔗糖和7g/L的琼脂粉,即得。
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