[发明专利]心叶紫金牛的组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种心叶紫金牛的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：A、繁殖复壮一体化培养：以心叶紫金牛的带芽茎段为外植体，将所述外植体接种到繁殖复壮一体化培养基内，接种完毕后转入培养室中培养，获得健壮的丛生芽；B、生根炼苗同步化培养：将步骤A获得的丛生芽接种到生根炼苗同步化培养基内，接种完毕后先转入培养室中培养再转入育苗大棚内培养，获得适宜移栽的完整植株；C、移栽：将步骤B获得的完整植株取出，洗净根部残留培养基，移栽至育苗床或育苗大棚继续培养。本发明具有生产周期短，生产成本低，种苗质量好、成活率高等优点，可为心叶紫金牛的品种保护和人工繁殖提供技术支持。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域。更具体地说，本发明涉及一种心叶紫金牛的组织培养快速繁殖方法。

背景技术

心叶紫金牛，又名走马风、红云草、红铺地毯，为紫金牛科紫金牛属植物，是瑶药“七十二风”中的走马风。心叶紫金牛为广西壮、瑶族常用药材，以全株入药，性凉，味苦，具有清热解毒、镇咳祛痰、活血止血、调经通络、消肿定痛的功效，用于治疗吐血、便血、咯血、血崩、疮疖、肺结核、慢性支气管炎、咳嗽气喘、月经不调、痛经、产后恶露不尽、产后体弱、风湿痹痛、跌打损伤等症。近年研究表明，心叶紫金牛还具有抗艾滋病毒、抑制胰岛素降解和抗心率失常等作用。

心叶紫金牛为珍稀濒危药用植物，处于纯野生状态，多生于海拔230-860m的密林下、水旁和石缝间荫湿处，地域分布零散且蕴藏量稀少。随着人们生活水平的提高和保健意识的增强，心叶紫金牛的市场需求量逐年攀升，野生资源遭到过度采挖，濒临枯竭。自然状态下，心叶紫金牛主要依靠种子进行繁殖，但种子量极为稀少，且萌发慢、萌发率低，给科学研究和引种栽培带来极大困难。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种心叶紫金牛的组织培养快速繁殖方法，其利用心叶紫金牛茎段进行组织培养，可有效缩短种苗生产周期，降低种苗生产成本，且种苗质量好、成活率高。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种心叶紫金牛的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：

A、繁殖复壮一体化培养：以心叶紫金牛的带芽茎段为外植体，将所述外植体接种到繁殖复壮一体化培养基内，接种完毕后转入培养室中，先在培养温度22-26℃，光照强度1400lux，光照时间8h/d的条件下培养15d，然后再在培养温度25-28℃，光照强度3500-4500lux的自然光照条件下继续培养15d，获得健壮的丛生芽，其中，繁殖复壮一体化培养基为：MS+1.0-2.0mg/L BA+0.3-0.5mg/L LFS+0.1-0.3mg/L IBA+0.1-1.0mg/L NAA；

B、生根炼苗同步化培养：将步骤A获得的丛生芽接种到生根炼苗同步化培养基内，接种完毕后转入培养室中，在培养温度22-26℃，光照强度1500lux，光照时间10h/d的条件下培养7d，待新根开始萌发后再转入育苗大棚内，在培养温度23-30℃，相对湿度为60-80％，遮光度为20-40％的自然光照条件下培养25d，获得适宜移栽的完整植株，其中，生根炼苗同步化培养基为：1/2MS+0.1-0.3mg/L IBA+0.5-1.5mg/L NAA+1.0-2.0mg/L IAA+0.3-0.5mg/L MET；

C、移栽：将步骤B获得的完整植株取出，洗净根部残留培养基，移栽至育苗床或育苗大棚继续培养。

其中，MS为MS基本培养基，BA为6-苄基腺嘌呤，LFS为灵发素，IBA为吲哚丁酸，NAA为萘乙酸，IAA为吲哚乙酸，MET为多效唑。