[发明专利]厚藤IpASR基因及其编码蛋白和应用有效
申请号: | 201710661281.9 | 申请日: | 2017-08-04 |
公开(公告)号: | CN107299103B | 公开(公告)日: | 2018-12-25 |
发明(设计)人: | 张美;张会;简曙光;夏快飞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院华南植物园 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/81;C12N15/70;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/20;C12R1/865 |
代理公司: | 广州广典知识产权代理事务所(普通合伙) 44365 | 代理人: | 谢伟 |
地址: | 510000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 厚藤 ipasr 基因 及其 编码 蛋白 应用 | ||
1.氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脱落酸/胁迫/成熟诱导蛋白IpASR和/或IpASR基因在提高植物对高盐/干旱的耐受中的应用,所述IpASR基因的cDNA阅读框为如SEQID NO.2所示的核苷酸序列,或为与SEQ ID NO.2互补配对的核苷酸序列,或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脱落酸/胁迫/成熟诱导蛋白的核苷酸序列;所述植物为拟南芥。
2.氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脱落酸/胁迫/成熟诱导蛋白IpASR和/或IpASR基因在农作物转基因育种中改良农作物对高盐/干旱耐受性、和/或调控农作物对氧化胁迫耐受性的应用,所述IpASR基因的cDNA阅读框为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,或为与SEQ ID NO.2互补配对的核苷酸序列,或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脱落酸/胁迫/成熟诱导蛋白的核苷酸序列;所述农作物为拟南芥。
3.插入有IpASR基因的酿酒酵母重组表达载体,其特征为,所述IpASR基因的cDNA阅读框为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,或为与SEQ ID NO.2互补配对的核苷酸序列,或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤IpASR蛋白的核苷酸序列。
4.权利要求3所述的酿酒酵母重组表达载体在提高工程菌株酿酒酵母对高盐和氧化胁迫的耐受性中的应用。
5.插入有IpASR基因的大肠杆菌表达载体,其特征为,所述IpASR基因的cDNA阅读框为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,或为与SEQ ID NO.2互补配对的核苷酸序列,或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤IpASR蛋白的核苷酸序列。
6.权利要求5所述的大肠杆菌重组表达载体在提高工程菌大肠杆菌对高盐和干旱胁迫耐受性中的应用。
7.一种提高拟南芥的耐盐和/或抗旱性的方法,其特征为,包括以下步骤:
(1)获得IpASR基因的cDNA全长,其cDNA阅读框序列如SEQ ID NO.2所示;
(2)将含有IpASR的cDNA全长的酵母表达载体pYES-DEST52重组质粒转化野生型酵母菌株W303,分别在含盐量5%-8.8%的培养基上测试转基因酵母的耐盐性;
(3)以含有IpASR基因cDNA的酵母表达载体pYES-DEST52重组质粒为模板,以引物扩增IpASR基因的cDNA全长阅读框序列,用于获取插入至拟南芥转基因超表达载体pMD1的cDNA阅读框片段,用于构建厚藤脱落酸/胁迫/成熟诱导蛋白转基因超表达重组载体IpASR-pMD1;
将上述厚藤脱落酸/胁迫/成熟诱导蛋白转基因超表达重组载体IpASR-pMD1转化进入农杆菌GV3101感受态菌株中,通过拟南芥花序侵染法转化拟南芥植株,通过Kan抗性筛选获得拟南芥转基因后代。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征为,步骤(3)中的引物为SEQ ID NO.5和SEQ IDNO.6。
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