[发明专利]用于扩增结核分枝杆菌耐药相关基因的引物对组合产品

说明书

本发明涉及一种用于扩增结核分枝杆菌耐药相关基因的引物对组合产品，其选自如下引物对组合中的任一组或两组：第一组，包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1‑10所示的引物对中的一对、多对或全部；第二组，包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO：11‑18所示的引物对中的一对、多对或全部；其中，每种引物对单独放置，且每对引物对中的上游引物和下游引物单独或混合放置。本发明所提供的9对引物对可以在两个反应体系中就完成9种基因的扩增，从而可以快速、准确地根据检测结果进行结核分枝杆菌耐药相关基因的检测。

技术领域

本发明涉及医学检验领域，具体而言，涉及一种用于扩增结核分枝杆菌耐药相关基因的引物对组合产品。

背景技术

结核病（tuberculosis，TB）是由结核分枝杆菌感染引起的一种严重威胁人类健康的传染性疾病。目前结核病耐药形式严峻。据估计全球约20%的结核分枝杆菌分离株至少耐一种主要的抗结核药物，更严重的是耐多药结核病、广泛耐药结核病、甚至全耐药结核病也已经出现并日趋增多。我国是结核病高负担国家，耐药疫情也十分严峻。据统计，我国新发和复发结核病例中耐多药结核病分别占5.7%和25.6%，其中约8%为广泛耐药结核病病人，均高于全球平均水平。因此，耐药结核病的快速诊断成为我国的重大需求，而如何简单、方便地获得耐药相关基因成为耐药结核病分子诊断的关键基础环节。

研究发现，结核分枝杆菌耐药相关基因发生一些位点发生错义突变是导致结核病耐药的一个重要原因。已经明确的这些耐药相关基因主要包括：与利福平耐药相关的rpoB基因，与异烟肼耐药相关的katG基因和inhA，与乙胺丁醇耐药相关的embB基因，与吡嗪酰胺耐药相关的pncA基因，与喹诺酮类药物耐药相关的gyrA基因，与链霉素耐药相关的rpsL基因，与卡那霉素和卷曲霉素耐药相关的rrs基因和eis基因。基于现代分子生物学技术的耐药基因突变检测技术可以快速检出病人体内结核分枝杆菌的耐药性，从而指导临床及时选择有效药物。而现代分子生物学技术的关键环节是这些耐药相关基因的简单、便捷和大量的获得，其中应用最广的是聚合酶链式反应（PCR）技术。

PCR技术是扩增并获得目的基因的应用最为广泛的实验技术，是目前分子检测的基础。但是单一PCR反应每次只能扩增一个基因，实际工作要完成上述多样本的九个耐药基因检测，工作量巨大。多重PCR（multiplex PCR）通过在同一反应体系里加入两对对以上的引物，可以在同一反应管中实现对多个核酸片段的扩增，在提高通量、保持高特异性和高敏感性的同时，能大大降低成本、节省标本，使分子生物学技术更加简单、快速和高效。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种引物对组合产品，所述的引物对组合产品可在两个多重PCR反应体系中扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明涉及一种引物对组合产品，其选自如下引物对组合中的任一组或两组：

第一组，包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1和2、SEQ ID NO：3和4、SEQ ID NO：5和6、SEQ ID NO：7和8、SEQ ID NO：9和10所示的引物对中的一对、多对或全部；

第二组，包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO：11和12、SEQ ID NO：13和14、SEQ IDNO：15和16、SEQ ID NO：17和18所示的引物对中的一对、多对或全部；

其中，每种引物对单独放置，且每对引物对中的上游引物和下游引物单独或混合放置。