[发明专利]一种横断雅致兜兰组培快繁及栽培的方法

权利要求书

1.一种横断雅致兜兰的组培快繁及栽培的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）蒴果采集：采集自然或人工成功授粉300天的雅致兜兰蒴果，将蒴果经蒸馏水洗后，在超净工作台上先新鲜配置10%的次氯酸钠溶液消毒20 min，再使用70%酒精表面消毒30s，再以0.2%氯化汞溶液消毒15min，最后用无菌水冲洗5次，灭菌滤纸吸干果实表面的水分；

（2）原球茎诱导：将消毒后的蒴果置于灭菌滤纸上吸干水分， 用灭菌解剖刀纵向切开蒴果， 抖出种子，将种子接种到灭菌的原球茎诱导培养基上，将培养瓶放置于20±2℃的暗环境里培养4-6周后，再转入光培养4-6周后，获得转绿且有叶原基出现的原球茎；光培养条件为：光照强度：12000-22000lux，光照时间为12h·d^-1；每升原球茎诱导培养基含有如下质量的成分：蔗糖20.5712g，硝酸钾AR 0.9500g，硝酸铵AR 0.8250g，磷酸二氢钾0.0850g，七水硫酸镁0.1850g，无水氯化钙0.1660g，乙二胺四乙酸二钠0.0372g，七水硫酸铁0.0279g，横断微量元素0.0185g，横断维生素0.1140g， 2-(N-吗非啉)乙磺酸MES 1.0000g，蛋白胨BR2.0000g，柠檬酸0.0213g；

（3）原球茎增殖及分化培养：将上述原球茎转入增殖继代培养基中，经90-150天培养后分化为完整、健壮的无根苗；每升增殖继代培养基含有如下质量的成分：蔗糖20.0000g，琼脂5.0000g，马铃薯粉5.0000g，硝酸钾 AR 0.2000g，磷酸二氢钾0.2000g，七水硫酸镁0.2000g，氯化钾0.1000g，柠檬酸铵0.0190g，横断微量元素0.0185g，横断维生素0.1200g，水解酪蛋白0.3000g，四水硝酸钙0.4000g，氢氧化钾 0.0360g；

（4）壮苗及生根培养：将健壮的无根苗转入生根壮苗培养基上，经150-180天培养后长成具有2-3条粗壮肉质根、高4~6cm的小苗，再转入生根壮苗培养基中继代一次，培养145-155d后获得高8-10cm具有4-6条粗壮肉质根的健壮植株；每升生根壮苗培养基含有如下质量的成分：蔗糖19.7121g，琼脂4.5000g，硝酸钾0.9500g，硝酸铵 0.8250g，磷酸二氢钾0.0850g，七水硫酸镁 0.1850g，二水硫酸钙0.5000g，乙二胺四乙酸钠铁盐0.0400g，横断维生素0.1140g， 2-(N-吗非啉)乙磺酸MES 1.0000g，蛋白胨 2.0000g，氯化钙0.1660g，氢氧化钾0.1470g；

（5）炼苗移栽：将培养瓶置于温室大棚炼苗1-2周后，取出生根苗，洗净根部培养基，0.1%甲基托布津或高锰酸钾溶液浸泡0.5h，800倍多菌灵溶液浸泡0.5h，种植于栽种基质中；其中大棚温度15-30℃，白天相对湿度50-80%，夜间相对湿度70-80%；

（6）大棚种植及病虫害防治：大棚种植于每年4-5月进行移栽种植，栽种4-6周后，喷施叶肥或使用缓释肥，喷施药剂预防虫害，大棚种植1~2年后达到开花尺寸；

所述横断微量元素由如下重量份配比的组分组成：水合硫酸锰0.0057000份，硼酸0.0000560份，无水硫酸铜0.0000624份，三氧化钼0.0000160份，七水硫酸锌 0.0003310份；所述横断维生素由以下质量百分比的组分组成：维生素B1 9.3333%，维生素B3 6.1667%，维生素B5 7.0833%，维生素B6 0.8333%，维生素H 0.0833%，维生素M 0.4167%，甘氨酸5.6667%，肌醇70.4167%。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（5）所述栽种基质由以下重量份配比的组分组成：珍珠岩1份、碎钙化石或白云石粉0.5份、松树皮2份、火山石2份。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（6）中所述的叶肥为含氮量0.5g/L的氮肥，缓释肥为2-3型的缓控肥，2型的为包膜缓释肥，3型的为添加脲酶抑制剂和硝化抑制剂的缓释肥；虫害的防治喷施50％杀螟松乳油1000～1500倍液或50％西维因可湿性粉剂500～1000倍液药剂；所述开花尺寸为具有5-6片8-10cm长叶的植株。