[发明专利]一种使兔子形成动脉粥样硬化的诱导饲料的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及转基因家兔模型技术领域，更具体地说涉及一种使兔子形成动脉粥样硬化的诱导饲料的制备方法。

背景技术：

心脑血管疾病是目前威胁群人类健康最严重的疾病，动脉粥样硬化是其病理基础，研究CVD离不开动物模型，我们知道人类CVD的发病与脂质代谢异常密切相关，动脉粥样硬化是所有CVD共同的病理基础，所以人类研究CVD离不开脂质代谢异常和动脉粥样硬化，现在生物医学研究中广泛使用小鼠和大鼠模型来研究CVD存在着缺陷：

(1)小鼠和大鼠体内脂蛋白以高密度脂蛋白(HDL)为主，HDL具有先天抗动脉粥样硬化作用，不易形成动脉粥样硬化。

(2)小鼠和大鼠的apoB100，又可以合成apoB48，因此小鼠和大鼠的apoB48即存在于肝源性极低密度脂蛋白(VLDL)中，也存在于肠源性乳糜微粒中，而人类的apoB48只存在于肠源性乳糜微粒中。

(3)小鼠和大鼠天生缺乏CETP。

发明内容：

本发明的目的就在于提供一种使兔子形成动脉粥样硬化的诱导饲料的制备方法，它可以生产专门用于转基因家兔模型培育过程中使得兔子形成动脉粥样硬化的诱导饲料。

为实现上述目的，本发明的一种使兔子形成动脉粥样硬化的诱导饲料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括的具体步骤为：选取家兔饲料，按比例加入相应的胆固醇、食用油，在60摄温度下，进行翻炒，使胆固醇、食用油与家兔饲料进行融合得到诱导饲料。

本发明的有益效果在于：本发明可以生产专门用于转基因家兔模型培育过程中使得兔子形成动脉粥样硬化的诱导饲料。

具体实施方式：

以下所述仅为体现本发明原理的较佳实施例，并不因此而限定本发明的保护范围。

实施例：在培育转基因家兔模型的时候，首先超数排卵和同期发情(注射孕马血清促性腺激素或促卵泡激素)诱导供体雌兔超数排卵，与雄兔交配后(17～20小时后)，处死供体雌兔，打开腹腔，取出输卵管，冲取、收集受精卵(将形态正常受精卵收集在一起培养，直至用于显微注射)然后将外源基因注射到受精卵的雄原核中(在200倍放大倍数下、在带有机械壁的倒置微分干涉相差显微镜下进行，用固定针吸住受精卵，将吸入注射针内的外源溶液注入到雄原核中)注射后的胚胎再移植给假怀孕的受体家兔(麻醉假孕受体家兔，仰位放置，无菌操作实施受精卵移植，在下腹部切开皮肤、肌肉和腹膜，找到卵巢和输卵管。给每只家兔移植30～40枚注射过的受精卵。仔兔出生2～3周后，取耳组织，提取基因组，用PCR或Southern杂交检测仔兔基因组中是否整合了外源基因，用Northern或Western杂交检测外源基因表达水平。如果表达轻微可以使用诱导饲料，进行诱导，饲喂4、8、12周依次分别进行血脂分析，直至达标。

本实施例中，诱导饲料的制造过程为：选取家兔饲料，按比例加入相应的胆固醇、食用油，在60摄温度下，进行翻炒，使胆固醇、食用油与家兔饲料进行融合得到诱导饲料。

本实施例中的家兔饲料可选取我们日常生活中普通的家兔饲料。

本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。