[发明专利]一种利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法

权利要求书

1.一种利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，包括以下步骤：

选取母株，经预处理后取气生根；

将所述气生根进行机械损伤，并分别接种至愈伤组织诱导培养基1号和愈伤组织诱导培养基2号中，得愈伤组织；

将所述愈伤组织转接至继代培养基中培养，即得；

所述愈伤组织诱导培养基1号包括如下成分：

改良MS培养基1号、6-苄氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、吲哚-3-乙酸、D丁酯、蔗糖、椰子水和琼脂粉；

所述愈伤组织诱导培养基2号包括如下成分：

改良MS培养基2号、6-苄氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、蔗糖、椰子水和琼脂粉。

2.如权利要求1所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述选取母株，经预处理后取气生根，包括：

选取母株运用多菌灵灌根；

取所述母株生长点处茎段；

将所述茎段消毒，得气生根外植体。

3.如权利要求2所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述选取母株运用多菌灵灌根，包括：

选取母株使用80％多菌灵1000倍溶液进行灌根30天，每10天1次。

4.如权利要求1-3任一项所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，

所述愈伤组织诱导培养基包括愈伤组织诱导培养基1号和愈伤组织诱导培养基2号；

所述将所述气生根进行机械损伤，并接种至愈伤组织诱导培养基中，得愈伤组织，包括：

将所述气生根修剪后，得修剪茎段；

将所述修剪茎段进行机械损伤；

将所述机械损伤的修剪茎段接种至愈伤组织诱导培养基1号中，在温度25℃-28℃和湿度50％-65％的条件下进行培养，得第一愈伤组织；

将所述第一愈伤组织转入愈伤组织诱导培养基2号中，在温度25-28℃，湿度为50-65％的条件下进行培养，获得第二愈伤组织。

5.如权利要求1所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基1按如下方法配置：

在改良MS培养基1号中，按照浓度加入5.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、1mg/L的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/L的吲哚-3-乙酸、0.05mg/L的D丁酯、30g/L的蔗糖、100ml/L的椰子水和7g/L的琼脂粉，调节PH值至5.6-5.8，即得；

所述愈伤组织诱导培养基2按如下方法配置：

在改良MS培养基2号中，按照浓度加入1.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.1mg/L的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/L的萘乙酸、0.1mg/L的吲哚-3-乙酸、蔗糖、30g/L的椰子水和7g/L的琼脂粉，调节PH值至5.6-5.8，即得。

6.如权利要求5所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述改良MS培养基1号按如下方法配置：

以MS培养基为基础，还包括以下成分，并调整含量为：

肌醇：1-5mg/L；

盐酸硫胺素：3-6mg/L；

盐酸吡哆醇：0.5-2mg/L；

烟酸：0.5-3mg/L；

精氨酸：50mg/L；

天冬氨酸：100mg/L；

谷氨酸：150mg/L。

7.如权利要求1所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述将所述愈伤组织转接至继代培养基中培养，即得，包括：

将所述愈伤组织转接至亟待培养基中在预设培养条件下进行培养；

每40天继代一次，即得。

8.如权利要求7所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述预设培养条件，包括：

光照强度：1500-20001x；

光照时间：12小时/日；

温度：25℃-28℃；

湿度：50％-65％。

9.如权利要求7所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述继代培养基包括如下组分：

改良MS培养基2号、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖、琼脂粉。

10.如权利要求7所述利用气生根诱导绿萝愈伤组织的方法，其特征在于，所述继代培养基，按如下方法进行配制：

制备改良MS培养基2号：以MS培养基为基础，调整其中大量元素为所述MS培养基原有含量的1/2；还包括以下成分，并调整含量为：肌醇：1-5mg/L、盐酸硫胺素：3-6mg/L、盐酸吡哆醇：0.5-2mg/L、烟酸：0.5-3mg/L、精氨酸：100mg/L、天冬氨酸：50mg/L和谷氨酸：200mg/L；

在改良MS培养基2号中，按照浓度加入2.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.3mg/L的吲哚-3-乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂粉，调节PH值至5.6-5.8，即得。