[发明专利]一种PD-L1探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种PD-L1探针的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）四氧化三铁纳米粒子的制备

在有机溶剂中，FeCl₃·6H₂O、还原剂、弱碱进行水热反应，得到所述四氧化三铁纳米粒子；

（2）氧化石墨烯的制备

在浓硫酸与发烟硝酸中，石墨和氯酸钾进行氧化反应，得到所述氧化石墨烯；

（3）四氧化三铁/氧化石墨烯复合材料的制备

在溶液中，四氧化三铁纳米粒子、PDDA、氧化石墨烯进行超声，得到所述四氧化三铁/氧化石墨烯复合材料；

（4）四氧化三铁/氧化石墨烯/二氧化钛复合材料的制备

将步骤（3）制备的四氧化三铁/氧化石墨烯复合材料分散在有机溶剂中，并向其中加入氨水；将该混合物进行超声；将钛酸四丁酯（TBOT）加入体系中进行反应，搅拌，然后经烘干，煅烧得到所述四氧化三铁/氧化石墨烯/二氧化钛复合材料；

（5）四氧化三铁/氧化石墨烯/二氧化钛复合材料SERS性能表征

将拉曼光谱信号分子溶液与二氧化钛包裹的四氧化三铁/氧化石墨烯复合材料混合振摇；将得到的混合物离心分离，然后重新分散在超纯水中；将上述溶液滴加至硅片上干燥，在激光激发下，测试拉曼光谱信号；

（6）PD-L1探针的制备

（6-1）向拉曼光谱信号分子溶液中加入四氧化三铁/氧化石墨烯/二氧化钛复合材料，进行孵育，离心分离，将固体样品真空干燥，得到蓝色固体粉末；

（6-2）然后将得到的蓝色固体粉末与PD-L1抗体进行恒温孵育，得到所述PD-L1探针。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述有机溶剂选自乙二醇和/或丙三醇；和/或，所述还原剂选自柠檬酸钠、硼氢化钠、抗坏血酸中的一种或多种；和/或，所述弱碱选自醋酸钠、氨水、碳酸氢钠中的一种或多种；和/或，所述水热反应的温度为150-250℃；和/或，所述FeCl₃·6H₂O、还原剂和弱碱的质量比为（2-4）：（0.8-1.5）：（4-8）。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述氧化反应的温度为0-30℃；和/或，所述氧化反应的时间为48h-120h；和/或，所述浓硫酸、发烟硝酸、石墨、氯酸钾的用量比为（50ml-100ml）：（30ml-50ml）：（3g-8g）：（40g-60g）。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述溶液选自水、乙醇、甲醇中的一种或多种；和/或，所述PDDA的浓度为1%；和/或，所述超声的条件为120kW；和/或，所述超声的温度为0℃-50℃；和/或，所述超声的时间为15min-60min；和/或，所述四氧化三铁纳米粒子、PDDA、氧化石墨烯的用量比为（5ml-20ml）：（1ml-10ml）：（3 ml -10 ml）。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述有机溶剂选自无水乙醇和/或甲醇；和/或，所述氨水的浓度为28%；和/或，加入钛酸四丁酯（TBOT）后，进行反应的温度为30℃-60℃；和/或，加入钛酸四丁酯（TBOT）后，进行反应的时间为12h-36h；和/或，所述超声的条件为120kW；和/或，所述超声的温度为15℃-30℃；和/或，所述超声的时间为5min-30min；和/或，所述反应的温度为30℃-60℃；和/或，所述烘干的条件为60℃-120℃；和/或，所述煅烧的温度为400℃-600℃；所述煅烧的时间为1h-3h；和/或，所述四氧化三铁/氧化石墨烯复合材料、无水乙醇、氨水、钛酸四丁酯（TBOT）的用量比为（1ml-3ml）：（10ml-30ml）：（40μL-80μL）：（0.05ml-0.2ml）。