[发明专利]西瓜肉色性状主效基因位点及其InDel分子标记和应用有效
申请号: | 201710673538.2 | 申请日: | 2017-08-09 |
公开(公告)号: | CN107254542B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 李娜;马双武;尚建立;王吉明;李楠楠 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 河南科技通律师事务所 41123 | 代理人: | 张晓辉;樊羿 |
地址: | 450009 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 西瓜 肉色 性状 基因 及其 indel 分子 标记 应用 | ||
1.一种西瓜肉色性状主效基因位点的InDel分子标记,其特征在于,所述分子标记的核苷酸序列为AAATGAAACATGATATATTAAGG。
2.一种权利要求1所述西瓜肉色性状主效基因位点的InDel分子标记的引物,其特征在于,所述分子标记的上游引物为InDel19_fc6F,核苷酸序列为CTTTAATGCCTAATAACCAA;所述分子标记的下游引物为InDel19_fc6R,核苷酸序列为AAAGGAGGAAATTCAAATCA。
3.一种西瓜肉色基因型的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1) DNA提取:利用CTAB法提取西瓜植株总DNA;所述西瓜品种为 “ZXG01478”和“14CB11”的子代、“ZXG01478”或“14CB11”;
(2) PCR扩增:反应体系:100 ng/μL西瓜植株总DNA 1μL、权利要求2所述引物InDel19_fc6F 10 μmol/L 1 μL、权利要求2所述引物InDel19_fc6R 10 μmol/L 1 μL、2×Power TaqPCR MasterMix 12.5 μL、ddH2O 9.5 μL;反应程序:94℃ 5 min,35个循环的94℃ 20 s、55℃ 1 min、72℃ 30 s、72℃ 5 min;
(3) 电泳图谱分析:对所述扩增产物进行8%聚丙烯酰胺凝胶电泳、显影、染色和带型判读,找到目标条带,根据所述扩增产物的条带大小及位置关系确定所属基因型,198bp的条带代表粉红肉色基因型,175bp的条带代表红肉色基因型。
4.权利要求1所述的西瓜肉色性状主效基因位点的InDel分子标记在西瓜肉色基因图位克隆中的应用。
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