[发明专利]一种蛋白质等电纯化装置及方法在审

专利信息
申请号: 201710677641.4 申请日: 2017-08-09
公开(公告)号: CN107245093A 公开(公告)日: 2017-10-13
发明(设计)人: 周洲;赖兵;陈娇;杨莉;黄迎春;翟祎星 申请(专利权)人: 赖兵
主分类号: C07K1/28 分类号: C07K1/28
代理公司: 成都顶峰专利事务所(普通合伙)51224 代理人: 陈钱
地址: 610000 四川省成*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 蛋白质 纯化 装置 方法
【权利要求书】:

1.一种蛋白质等电纯化装置,其特征在于,包括泵(9)、电泳槽(8)、电源(7)、储液缸(10)和废液缸(11);所述的电泳槽是由有机玻璃板拼接制成的方形直槽,有机玻璃板的连接处采用透明硅橡胶进行粘接和密封处理;所述的储液缸(10)包括正极储液缸和负极储液缸;

所述的电泳槽的内侧面纵向设置有两排滑槽,滑槽内设置有由多孔材料制成的多孔滤膜(4),多孔滤膜(4)对蛋白质的截留分子量大于100kD;多孔滤膜将电泳槽划分为样品池(3)、正极电极池(101)和负极电极池(1);

电泳槽侧壁上对应样品池的区域内设置有样品进液口和样品出液口;

电泳槽侧壁上对应正极电极池的区域内设置有正极进液口和正极出液口;

电泳槽侧壁上对应负极电机的区域内设置有负极进液口和负极出液口;

所述的正极电极池上设置有正极电极孔,电源连接正极电极针(6)通过正极电极孔伸入正极电极池;负极电极池上设置有负极电极孔,电源连接负极电极针(5)通过负极电极孔伸入负极电极池;

所述的正极电极池和负极电极池内均设置有电极丝(2),电极丝分别与正极电极针和负极电极针连接。

2.根据权利要求1所述的一种蛋白质等电纯化装置,其特征在于,所述的电极丝平行布置,且电极丝之间的间距为10-50mm。

3.根据权利要求1所述的一种蛋白质等电纯化装置,其特征在于,所述的多孔滤膜为微滤膜。

4.根据权利要求1所述的一种蛋白质等电纯化装置,其特征在于,所述的泵为蠕动泵,蠕动泵的进口与储液缸连通,蠕动泵的出口分别与正极进液口、负极进液口连通。

5.根据权利要求1所述的一种蛋白质等电纯化装置,其特征在于,所述的正极出液口和负极出液口分别连接到废液缸。

6.根据权利要求1所述的一种蛋白质等电纯化装置,其特征在于,所述的正极出液口和负极出液口位于电泳槽不同的侧壁上。

7.采用权利要求1-6中任一所述的蛋白质等电纯化装置进行蛋白质等电纯化的方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤一:将待纯化蛋白质溶于与其等电点pI相同pH的缓冲液中;

步骤二:将步骤一中配置得到的溶液加入样品池中备用;

步骤三:向正极电极池和负极电极池中加入缓冲液,该缓冲液与步骤一中使用的缓冲液具有相同的缓冲试剂及浓度,对正极电极池,pH范围为(pI-1)至pI,对负极电极池,pH范围为pI至(pI+1);

步骤四:向正极储液缸及负极储液缸中加入缓冲液,该缓冲液与步骤三中选用的溶液所使用的缓冲液相同;

步骤五:启动蠕动泵更新正极电极池和负极电极池中的缓冲液;

步骤六:启动电源进行5-15分钟电泳纯化。

8.根据权利要求7所述的一种蛋白质等电纯化方法,其特征在于,步骤一所述的缓冲液包括:

NaAc(50mM,pH5.0)缓冲液、Na2HPO4/NaH2PO4(50mM,pH6.8)缓冲液或TrisHCl(50mM,pH8.5)缓冲液。

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