[发明专利]一种脐血造血干细胞的冻存液在审
申请号: | 201710678108.X | 申请日: | 2017-08-10 |
公开(公告)号: | CN107347874A | 公开(公告)日: | 2017-11-17 |
发明(设计)人: | 朱学义;徐峰波;聂江华;王豪东;王小龙;魏天迪 | 申请(专利权)人: | 河南省银丰生物工程技术有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 南京源古知识产权代理事务所(普通合伙)32300 | 代理人: | 马晓辉 |
地址: | 450000 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 造血 干细胞 冻存液 | ||
技术领域
本发明属于生物技术领域,特别涉及一种脐血造血干细胞的冻存液。
背景技术
脐血也叫脐带血,是指胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,通常是废弃不用的。近十几年的研究发现,脐血中含有可以重建人体造血和免疫系统的造血干细胞,可用于造血干细胞移植,治疗多种疾病。因此,脐血已成为造血干细胞的重要来源,特别是无血缘关系造血干细胞的来源。也是一种非常重要的人类生物资源。
脐血中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成人体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞,神经细胞,骨骼细胞等等。随着科技的发达,医学专家研究出利用脐带血中的干细胞来治疗疾病的方法。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体。这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。近三十年来的医学研究发现,脐血中含有非常丰富的造血干细胞(HSC),可以重建人体造血和免疫系统,可用于造血干细胞移植,治疗血液系统、免疫系统,以及遗传代谢性及先天性疾病。因此,脐血已成为造血干细胞的重要来源,已经被广泛地应用于临床,是宝贵的人类生物资源。
世界范围内,目前脐血已经用于治疗各种类型白血病、再生障碍性贫血、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、神经母细胞瘤、粘多糖病、地中海贫血、骨髓发育不良症候群、原发性免疫缺陷病、慢性肉芽肿等80多种疾病。
我国卫生部颁发的《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)》中规定,脐带血造血干细胞治疗技术适应症包括以下10余类:骨髓衰竭、血红蛋白病、重症免疫缺陷病、代谢性疾病、白血病、骨髓增生异常综合症、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、恶性肿瘤、重症再生障碍性贫血和重症放射病等。
发明内容
本发明的目的是提供一种脐血造血干细胞的冻存液,以减少冻存液对脐血造血干细胞的损伤作用。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案是:
一种脐血造血干细胞的冻存液,所述冻存液由冻存保护剂、胎牛血清、培养基组成;
所述培养基由以下组分组成:
基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、丙酮酸、L-谷氨酰胺、叶酸、β-巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸。
优选的,所述培养基中,各组分的含量如下:
基础培养基10-50g/L,人血清白蛋白5-20g/L,杨梅素5-20mg/L,三七总皂苷5-20mg/L,大黄素5-20mg/L,亚油酸2-10mg/L,胰蛋白酶1-10mg/L,抑肽酶4-10mg/L,光蛋白聚糖5-20μg/L,碱性成纤维细胞生长因子1-10μg/L,丙酮酸5-15mg/L,L-谷氨酰胺5-20mg/L,叶酸1-15mg/L,β-巯基乙醇2-10mg/L,黄芪多糖50-80mg/L,转铁蛋白1-10mg/L,维生素80-500mg/L,氨基酸80-500mg/L。
更优选的,所述培养基中,各组分的含量如下:
基础培养基20-30g/L,人血清白蛋白10-15g/L,杨梅素10-15mg/L,三七总皂苷10-15mg/L,大黄素10-15mg/L,亚油酸5-8mg/L,胰蛋白酶4-8mg/L,抑肽酶6-9mg/L,光蛋白聚糖10-15μg/L,碱性成纤维细胞生长因子2-8μg/L,丙酮酸8-12mg/L,L-谷氨酰胺10-15mg/L,叶酸5-10mg/L,β-巯基乙醇5-8mg/L,黄芪多糖60-70mg/L,转铁蛋白2-8mg/L,维生素180-360mg/L,氨基酸180-360mg/L。
再优选的,所述培养基中,各组分的含量如下:
基础培养基24g/L,人血清白蛋白12g/L,杨梅素12mg/L,三七总皂苷12mg/L,大黄素13mg/L,亚油酸6mg/L,胰蛋白酶5mg/L,抑肽酶8mg/L,光蛋白聚糖13μg/L,碱性成纤维细胞生长因子5μg/L,丙酮酸11mg/L,L-谷氨酰胺12mg/L,叶酸8mg/L,β-巯基乙醇6mg/L,黄芪多糖68mg/L,转铁蛋白5mg/L,维生素280mg/L,氨基酸260mg/L。
优选的,所述人血清白蛋白为人脐血人血清白蛋白;基础培养基为IMDM培养基;所述维生素为水溶性维生素;所述氨基酸为多种氨基酸复合物。
优选的,所述冻存保护剂为渗透性冷冻保护剂,由甘油、二甲基亚砜、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇的一种或多种组成。
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