[发明专利]一种金荞麦中的荞麦碱及其含量测定方法

权利要求书

1.一种从金荞麦中提取荞麦碱的方法，其特征在于，其通过如下方法提取得到：

（1）将金荞麦干燥并粉碎，将粉碎后的药材以1：6~14的固液比用纯化水回流提取1~3次，每次1~2小时，过滤后，合并滤液；

（2）过滤后减压浓缩至相对密度1.10~1.20，得浸膏；

（3）将浸膏加95%乙醇醇沉至含醇量30%~70%，离心取上清；

（4）选择强酸性阳离子交换树脂，湿法装柱后进行预处理，以0.5~1.5ml/min的流速将醇沉上清液进行动态饱和吸附；

（5）选用0.5mol/L~1.2mol/L的氨水洗脱液以3~6倍柱体积对吸附饱和的强酸性阳离子交换树脂进行洗脱，控制洗脱液流速0.5~1.5ml/min，收集洗脱液；

（6）将收集的洗脱液浓缩去氨，加至预处理好的强碱性阴离子交换树脂上，以除色素和阴离子杂质，用4~8倍柱体积的纯化水洗脱，收集洗脱液；

（7）将上述收集的洗脱液，减压浓缩至相对密度1.10~1.20，放入洁净干燥的玻璃培养皿中，置低温冰箱中冷冻3小时，再置于冷冻干燥机中冷冻干燥36~72小时，干燥后得浅黄色粉末状固体，取出后称重，立即置于干燥器中存放，即得到金荞麦中荞麦碱。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中金荞麦药材以1：10的固液比用纯化水回流提取2次，每次1.5小时；步骤（2）中过滤后减压浓缩至相对密度1.15；步骤（3）中将浸膏加95%乙醇醇沉至含醇量50%。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，强酸性阳离子交换树脂的型号为lewatit-100、Amberlite200、Ionresin 004、Ionresin IR-102中的任意一种，所述强酸性阳离子交换树脂的预处理方法为：先用2BV、95%乙醇浸泡12小时，再用95%乙醇洗至清亮，然后用纯水洗至无醇味为止；再用2倍树脂体积的4%HCl处理，然后用蒸馏水洗至中性，再用2倍树脂体积的4%NaOH洗柱，再用蒸馏水洗至中性；最后强酸性阳离子交换树脂用4倍量4%HCl，使其转成H型，再用蒸馏水洗至中性备用。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（6）中，所示的强碱性阴离子交换树脂的型号为D290、Amberlite IRA400、Amberlite IRA402、Lewait MP500中的任意一种，所述强碱性阴离子交换树脂的预处理方法为：先用2BV、95%乙醇浸泡12小时，再用95%乙醇洗至清亮，然后用纯水洗至无醇味为止；再用2倍树脂体积的4%HCl处理，然后用蒸馏水洗至中性，再用2倍树脂体积的4%NaOH洗柱，再用蒸馏水洗至中性；最后强碱性阴离子交换树脂用4倍量4%NaOH，使其转成OH型，再用蒸馏水洗至中性备用。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）、步骤（5）中控制流速均为0.8ml/min，步骤（5）、步骤（6）洗脱的柱体积分别为5BV、6BV。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（7）中洗脱液减压浓缩至相对密度1.10，冷冻干燥48小时，干燥后提取物中荞麦碱的纯度≥65%。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括对提取的荞麦碱的含量进行测定的步骤：

（1）色谱条件：选用Hypersil NH₂色谱柱，250mm×4.6mm，5μm，流动相为乙腈-0.15%醋酸水溶液，流速0.9 ml/min，柱温30℃，检测波长205nm，进样量10μL，理论塔板数以荞麦碱计不低于3000；

（2）对照品溶液的制备：精密称定荞麦碱对照品20 mg，置25ml的容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得，作储备液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取干燥并经粉碎的金荞麦药材1g，置100ml圆底烧瓶中，加入石油醚20 mL进行脱脂处理，在水浴回流提取1 h，滤过，再用少量石油醚洗涤残渣，挥干溶剂，精密加入甲醇-0.05M的盐酸溶液40 mL，涡旋混合，超声，离心后取上清，重复操作一次，合并提取液，放冷，转移至100ml量瓶中，甲醇定容，摇匀即得。